应用胚胎干细胞试验模型对碱性成纤维细胞生长因子-中国药理学通报.PDFVIP

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１２Ｍａｒ；２８（３）：３４７～５１ ·３４７· 网络出版时间：２０１２－３－２１６：０３　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１６０３．２０１２０３．３４７＿０１２．ｈｔｍｌ 应用胚胎干细胞试验模型对碱性成纤维细胞生长因子 发育毒性的初步评价 １，２ １ １ １ １ ３ 许　华 ，邓淑琴 ，何　清 ，苏本金 ，江海香 ，黄亚东 （暨南大学１．药学院，２．中药药效物质基础及创新药物研究广东省高校重点实验室， ３．医药生物技术研究开发中心，广东广州　５１０６３２） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１２．０３．０１２ ８周龄，体质量（２０±２）ｇ，购自中山大学实验动物中 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１２）０３－０３４７－０５ 心，动物许可证号：ＳＣＸＫ（粤）２００９００１１。 中国图书分类号：Ｒ３３２；Ｒ３２９．２４；Ｒ３２１；Ｒ９９４．１；Ｒ９７７．６ １．２　细胞系　ＢＡＬＢ／ｃ３Ｔ３购自中山大学细胞库， 摘要：目的　利用小鼠胚胎干细胞试验（ＥＳＴ）模型，初步评 ＥＳＤ３由浙江大学朱丹燕教授惠赠。 价ｂＦＧＦ的发育毒性。方法　体外培养小鼠胚胎干细胞 １．３　主要试剂　ｂＦＧＦ，购自广东南海朗泰制药有 （ＥＳＣ），通过形态学观察、碱性磷酸酶染色和ＲＴＰＣＲ方法 限公司，批号 碱性磷酸酶试剂盒，购自 进行ＥＳＣ未分化鉴定；ＭＴＴ法检测不同浓度ｂＦＧＦ对ＥＳＣ和 ３Ｔ３细胞的毒性，ＲＴＰＣＲ半定量分析法检测ｂＦＧＦ对未分化 碧云天生物技术研究所；白血病抑制因子（ｌｅｕｋｅｍｉａ 基因Ｓｏｘ２表达的影响。结果　ｂＦＧＦ对ＥＳＣ和３Ｔ３的半数 ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ；ＬＩＦ），货号 ＥＳＧ１１０６购自Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ 抑制浓度和 ＥＳＣ的半数抑制分化浓度分别为 ＩＣ ＥＳＣ＝ 公司；丝裂霉素Ｃ购自Ｒｏｃｈｅ公司；ＥＳ细胞培养基 ５０ －１ －１ －１ １５２ｍｇ·Ｌ ，ＩＣ ３Ｔ３＝２４２ｍｇ·Ｌ ，ＩＤ ＥＳＣ＝１７ｍｇ （含有１５％胎牛血清ＦＢＳ，０１ｍｍｏｌ·Ｌ 巯基乙 ５０ ５０ β －１ －１ －１ ·Ｌ 。结论　ｂＦＧＦ发育毒性的判定为弱胚胎毒性。 醇，２ｍｍｏｌ·Ｌ Ｌ谷氨酰胺，０１ｍｍｏｌ·Ｌ 丙酮酸 －１ 钠，１％青 －链霉素，０１ｍｍｏｌ·Ｌ 非必需氨基酸 关键词：小鼠胚胎干细胞；胚胎干细胞试验模型；碱性成纤维 －１ ＮＥＡＡ和１０００ｋＵ·Ｌ ＬＩＦ），高糖 ＤＭＥＭ培养基 细胞生长因子；Ｓｏｘ２胚胎毒性；发育毒性 （含１０％ ＦＢＳ，１％青－链霉素）