改善骨质疏松状态下植入体稳定性及骨代谢的研究.DOCVIP

附件2 论文中英文摘要 作者姓名：高莺 论文题目：改善骨质疏松状态下植入体稳定性及骨代谢的实验研究 作者简介：高莺，女，1975年12月出生，2006年9月师从于四川大学胡静教授，于2009年6月获博士学位。 中 文 摘 要 一、研究背景 随着社会老龄化的进展，骨质疏松症已成为危害中老年健康的常见病、多发病。由于骨吸收远远快于骨形成，使得骨质疏松患者在接受骨折固定、牙种植体与人工关节植入以及骨缺损整复治疗时面临钛钉等生物材料植入体稳定性降低的问题。停经后骨质疏松又是其中最常见的一种全身骨代谢性疾病，由于雌激素缺乏导致骨密度减少、骨脆性增加，特别是破骨细胞活性远大于成骨细胞活性，使得植入体周围新骨形成减少，从而严重影响植入体的稳定性，导致其最终松动脱落与治疗失败。目前，探索各种合理与有效的措施或方法改善停经后骨质疏松症患者的骨代谢状况，提高植入体-骨整合能力已经成为口腔颌面整复外科、骨科及老年医学等学科领域中的一个重要课题，也是本研究的主要任务和目标。 虽然在提高植入体骨整合领域已取得一些成果，但仍存在许多亟待解决的问题：（1）双膦酸盐（BPs）是目前应用广泛、疗效确切的一种抗骨质疏松药物，通过口服、静脉等系统性全身用药，能够通过直接或间接作用抑制破骨细胞的增殖和活性，改善骨代谢，并提高骨质疏松病人植入体骨整合性能。然而，与长时间、大剂量使用该药物相关联的高并发症不容忽视，如胃肠不良反应、依从性差、颌骨坏死、过度抑制骨转换等。（2）碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）是一种常见的组织再生促生长因子，在临床及药物应用方面具有较大的潜力，例如可以促进血管新生、增强伤口愈合、调控骨髓细胞的增殖和分化、诱导新骨生成等。但是，如直接应用于体内，由于较短的半衰期，会导致该生长因子快速扩散、变性和降解，而不能达到预期疗效，从而使其临床应用受限。因此，在本课题中，我们致力于寻找有效干预措施，考察能否采取局部使用BPs的途径改善植入体的稳定性，能否利用羟基磷灰石涂层（HA）、基质胶（Matrigel）等缓释介质延长bFGF体内生物活性，能否将抑制破骨的BPs与促进成骨的bFGF联合局部应用，并探讨这种双重干预治疗是否对提高停经后骨质疏松状态下植入体的稳定性有协同效应。 此外，考虑到停经后骨质疏松患者可能伴发糖尿病等全身疾病，有必要考虑临床常用降血糖药物如二甲双胍对骨质疏松患者骨代谢的影响，这也是针对这部分患者实施种植治疗选择降糖药时需要考虑的一个因素。有研究报道，糖尿病可以通过多个途径影响骨形成和骨吸收之间的动态平衡，如肥胖、胰岛素水平、高血糖、细胞外基质蛋白的糖化作用等。在糖尿病患者这一特殊人群中，骨质疏松及骨质疏松性骨折的发生率较对照人群均明显增高，而口服二甲双胍不仅能起到有效控制血糖的作用，还能够同时减低骨质疏松性骨折的发生率,但其作用机制并不清楚。因此，在本课题中，我们还探讨了二甲双胍对停经后骨质疏松状态下骨代谢的影响，对骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖和分化能力的影响，致力于二甲双胍干预的机制研究，考察了二甲双胍所具有的降低糖尿病患者骨质疏松性骨折发生率的生物学基础。 二、研究目的 本研究是针对骨质疏松症患者异常的骨代谢状态以及面临生物材料植入体稳定性降低的问题而设计的一个临床应用基础课题，旨在建立SD大鼠停经后骨质疏松动物模型的基础上，综合利用bFGF的促成骨效应及BPs抑制破骨作用的药物学特性，以提高骨质疏松状态下的植入体-骨整合能力，进一步了解骨质疏松异常骨代谢的相关细胞生物学机制，以及二甲双胍对骨髓MSCs与停经后骨质疏松状态下骨代谢的影响，以期为临床选择合适的、有利于改善骨质疏松状态与植入体稳定性的降糖药物提供实验依据。 三、研究方法 动物体内实验：雌性SD大鼠经过双侧卵巢摘除术建立停经后骨质疏松动物模型，3个月后随机分入不同组别行双侧胫骨植入体植入术。术后再喂养观察3个月，断颈法处死实验动物，进行标本的取材、固定及系列形态学和功能学检测。每只大鼠的双侧胫骨植入相同组别的植入体，取材后，随机将1侧胫骨用于组织学检测，而另1侧胫骨用于显微CT和生物力学检测，由此得出多种BPs及bFGF单独和联合局部应用于植入体对其周围新骨形成、种植体-骨整合以及机械稳定性能的影响。此外，以假手术组大鼠作为对照组，停经后骨质疏松大鼠作为实验组，经由胃管给予生理盐水或二甲双胍，持续喂养2个月后断颈法处死大鼠，收集双侧胫骨样本，一侧用于双能X线、显微CT、组织学检查，另一侧则将其骨髓细胞用注射器冲洗出后进行RNA分离用于实时定量RT-PCR检测，从而得出口服二甲双胍对停经后骨质疏松状态下骨代谢的影响。 细胞体外实验：体外分离培养原代大鼠骨髓MSCs，对其进行成骨向、成脂向诱导分化，并于实验组添加二甲双胍。应用四甲基偶氮唑盐法（MTT）法检测细