甲状腺疾病患者人促甲状腺激素受体膜外区基因突变的研究-影像医学与核医学专业论文.docxVIP

圣兰竺翌兰!查墨全堡壁翌! 圣兰竺翌兰!查墨全堡壁翌! ．壁苎翌查兰苎兰兰竺竺!!一 甲状腺疾病患者人促甲状腺激素受体 膜外区基因突变的研究 中文摘要 人促甲状腺激素受体(hTSHR)存在于甲状腺滤泡细胞膜上， 属于鸟苷酸调节(G)耦联蛋白受体，为大分子糖蛋白。其膜外区与 促甲状腺激素(TSH)结合，来调节甲状腺细胞的功能和生长，也是 Graves病等自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease，AITD)产生TSHR自身抗体(TSHRAb)I拘主要靶抗原。 TSHR基因突变是高功能甲状腺腺瘤或结节发病的主要原因，并 可引起非自身免疫性甲状腺功能亢进和甲状腺功能减讲sHR 膜外区的基因突变被怀疑参与了AITD的发病。体实验使用枨Izol 试剂一步法，从手术切除的甲状腺组织中提取总RNA，使用自行 设计、合成的引物，运用逆转录．聚合酶链式反应(R丁一PCR)扩增出 完整的hTSHR膜外区基因。通过四色荧光标记的Sanger双脱氧 核苷三磷酸链末端终止法，在Beckman Coulter 2000型全自动 DNA序列分析仪上，对4例正常对照，12例Graves病患者，4 腺组织 扩增及 成功得 到长为1 300bp的hTSHR膜外区cDNA PCR产物；DNA测序方 法正确，顺利获得hTSHR膜外区完整的基因序列。在4例正常对 。 照，27例甲状腺疾病患者中，hTSHR膜外区基因序列与Nagayama 卫生部科学研究基金资助项目 卫生部科学研究基金资助项目 天津医科大学博士学位论文 或Misrahi等报告的hTSHR序列完全一致，均未发现有基因突变 或多形性现象。但在第661位核苷酸上发现有碱基替代现象，在 所有31例甲状腺组织中，20例碱基为胸腺嘧啶“T”，11例碱基 为胞嘧啶“C”。但它们组成的密码子由于遗传密码的简并性，它 们所编码的氨基酸是相同的，都是天冬酰 故并不会造成hTSHR氨基酸组成的改变 膜外区基因突变可能不是上述甲状腺疾病 它们的分子发病机制尚需进一步深入的研究。 关键词：甲状腺疾病 人促甲状腺激素受体 膜妇 基因突变 兰兰竺茎竺竺查苎全堡竺兰! 兰兰竺茎竺竺查苎全堡竺兰! 墨兰垦翌查兰堡主兰竺丝!!一 The Study on Mutations of the Extracellular Domain of Human Thyrotropin Receptor Gene in the Patients with Thyroid Diseases Abstract The human TSH(thyrotropin)receptor(hTSHR)exists in the plasma membrane of the thyroc：yte and plays a criticaI role in thyroid function and growth．The extracellular domain of the receptor，which is responsible for ligand binding，is thought to be the central autoantigen in Graves’disease and some other autoimmune thyroid disease(AITD)．Autoantibodies(TSHRAb) against the TSHR are thought to be involved ln the expression of AITD The gene mutations of the TSHR are thought to be the main causes of the thyroid autonomous hyperfunCtiOning adenomas and hyperfunctioning nodules，as welj as the causes of some nonautoimmune hyper—of hypothyroidism．Mutations of the exl：racellular domain of the TSHR gene are suspected to participate in the etiology fo the AITD．In this research．totaI RNAs were extracted frOm the thyroid tissues of four normal controls． twelve Graves’disease，four Hashimoto’thyroiditis and eleven nodular goiters