建立番茄转基因离体培养体系的研究-作物遗传育种专业论文.docxVIP

广西大学硕士学位论文 广西大学硕士学位论文 建立番茄转基因离体培养体系的研究 建立番茄转基因离体培养体系的研究 摘要 本研究以三个番茄栽培品种为主要试验材料，较全面、系统地探 讨了影响番茄离体培养的一些主要因素，试验结果表明： 1、不同灭菌剂对种子的灭菌效果差异较大，以75％酒精1分钟 +1 0％次氯酸钠20分钟+6％次氯酸钠20分钟的灭菌组合对番茄种子 灭菌效果最好。 2、半量培养基(1／2MS)比全量培养基(Ms)更有利于种子诱导 无菌苗的生长。 3、不同基因型材料在离体培养中，再生能力存在显著差异。 4、子叶再生频率比下胚轴高。 5、10天苗龄外植体诱导愈伤组织及不定芽的频率最高。 6、外植体的接种密度影响愈伤组织及不定芽的诱导，接种密度以 外植体5～10个／瓶较为适宜。 7、子叶切段大小影晌植株再生，以子叶横切2次的效果最好。 8、下胚轴形态学上端切段更有利于植株再生。 9、不同激素种类及配比对愈伤组织及不定芽的诱导效果不同。 10、以MS+6-BA2．o+KT2．o+IA‰．2(mg／1)为继代培养基，愈伤组织 及不定芽的继代效果最佳。 广西大学硕士学位论文 广西大学硕士学位论文 建立番茄转基因离体培养体系的研究 11、继代培养7夭，继代2代，不定芽的诱导率最高。缸着继代 L 、 培养时间的延长和继代代数的增加，不定芽的诱导率明显下降。i弘／、～ 12、全量培养基比半量培养基对番茄再生植株的生根壮苗效果好。 13、激素在番茄生根壮苗中起着重要的作用，不同基因型材料对 不同激素种类、浓度要求不同。 关键词：番茄，基因转化广离体培养，植株再生，一 笸塑 ￡堕盔兰堡主堂堡鲨塞 ￡堕盔兰堡主堂堡鲨塞 茎皇量垫楚苎里塞堡!堕茎笪墨塑婴塞 STUDIES oN THE ESTABLISHMENT OF TOMATO TRANSGENE SYSTEM IN VITRo CUUTURE ABSTRACT Some princiljlal factors affecting tomato culture in vitro were studied systematically on three varieties of tomato in this paper．The results indicated that： 1．The effects on seeds sterilization were quite different with different sterilants．75％CH3CH20H 1 min+10％NaCIO 20 rain+6％NaCIO 20 min had optimal effect on tomato seeds sterilization． 2．Half quantity of basic media(1／2MS)were more profit for growing of seedling with no germ than full quantity of that似S)． 3．There were different regeneration of different genotype varieties in vitro culture． 4．The frequency of regeneration of eotyledon was highcr than the hypocotyl’S． 5．The frequency of callus and buds induction with 10 days explants were the highest． 6．The inoculation density of the explants affected the callus and buds induction five to ten explants per culture bottle was suitable。 7．Different cotyledon’S sizes affected the plant regeneration，two cutting timeswasthebest． 8．The upper segments of hypoeotyl were more advantageous to the plant regeneration． 9．The induction effects of the callus and the buds induction were quite complex according to different hormone categories．concentrations and their 3 广西大学硕士学位论文