草甘膦残留的酶联免疫分析方法的建立-食品安全快速检测网.PDF

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第 卷第 期 湖北农业科学 51 5 Vol. 51 No.5 湖 北 农 业 科 学 2012 年 年 月 , 2012 3 Hubei Agricultural Sciences Mar. 2012 草甘膦残留的酶联免疫分析方法的建立 潘熙萍,楼佳俊,张高精,张丽莎,施曼玲 (杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州 310036 ) 摘要:通过碳化二亚胺法将草甘膦(Glyphosate ,GLY )分别与卵清蛋白(OVA )和牛血清白蛋白(BSA )偶联 制备免疫原和包被原。 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS )检测表明,草甘膦与牛血 清白蛋白和卵清蛋白的偶联比分别为 和 。 合成的免疫原作用新西兰大白兔制备出草甘膦多克隆 11∶1 9∶1 抗体, 检测抗体溶液效价为 7 , 该抗体不与草甘膦的结构类似物增甘膦和双甘膦起交叉反 ELISA 1∶1×10 应。 以此抗体建立了草甘膦间接竞争ELISA 检测方法(ciELISA ),其线性范围为0.78~100 μg/mL ,线性回 归方程为 , 2 。草甘膦的检测限为 , 。 y =15.851 0 lnx +7.780 5 R =0.993 8 IC10=1.15 μg / mL IC50=14.35 μg / mL 在添加回收试验中,草甘膦添加值 和 时,玉米粉中的草甘膦回收率为 和 ,小麦 5 10 μg / g 104.12% 81.37% 粉中的回收率则分别为 118.94%和为 109.39%。 结果表明, 采用所制备的多克隆抗体而建立的草甘膦 ciELISA 方法可有效地应用于玉米粉和小麦粉中草甘膦的残留检测。 关键词:草甘膦(Glyphosate ,GLY );多克隆抗体;间接竞争酶联免疫吸附法 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) S482.4 A 04

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