芥菜胰蛋白酶抑制剂基因mti2转化拟南芥菜的研究-蔬菜学专业论文.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的沦文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 独创性声明 本人声明所呈交的沦文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除了文cfI特别』Ju以标注和致谢的地方外，论文巾矸i包含其他 人已经发表或撰写过的硼f究成果，也不包含为获得湖南农业人学或其它教育机构 的学位或证一体而使用过的利料。与我 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均 已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 硼f究生签名： 州问：睁妒年易JJ，尹【j 关于论文使用授权的说明 本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用论文的规定，即：学校有权保留 送交论文的复E¨什利磁盘，允≯』：论文被查阅和借阅，可以采』Ij影印、缩印或扫描 等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可以用1i同方式在不同媒体 _J二发表、传播学位论文的全部或部分内容。 (保密的学位论文在解密厉应遵守此协议) 研究生签名 时问：o铲年6月，争曰 导师签名 ( 绺徊 时间：d毕年f月，垆同 芥菜胰蛋白酶抑制剂基因m比转化拟南芥菜的研究 芥菜胰蛋白酶抑制剂基因m比 转化拟南芥菜的研究 摘要 虫害是影嗡农{擘物j“爨秘菇矮翁重癸因素，毽戴壤秀壅藏蠢瑟秘奁生产上煲 有重要意义。但常规抗虫育种由于育种周期长，种质资源有限，加上抗虫机制不 太明了等原因，其利用受到极大的限制。植物基因工程的快速发展为抗性育种提 绫了～条襄凝嚣鸯效豹途径，，芥菜璇蛋巍酶静裁翔2(麓下121是飙螽芬麓静子中分 离“{来的，它对鳞翅日幼呶中肠内的蛋一酶具有较强抑制作用。因此，芥菜胰氍 自酶抑制剂基因mti2可作为～种很好的提高植物抗虫性的备选基因。 本疆究遂过琢穰渗入转纯法，将鞠建在葳粒载{奉潍￥疆一7|}二豹辩{12基因编 码的cDNA序列导入拟南芥菜，以进一步研究该基因谯寄主植物体内的表达特点 刺抗虫性。生硬实验结果如F： l筏疆琢彼渗入法褥难{2蘩瓣转入季陵裹芬蒺，最终鹣转纯额率为瓴2～2．蹁。穗 转化的过程中用o．02％的激面活性剂Tween 2()替代常用的s“wet I．一77。 2对部分通过净那霉素筛选的抗性植株进行了PcR和PcR-Southern检测，其中 PcR检测豹黼性率为#8。9端，pc融southe鞠捡测菠骝淫率羹lOO％。哥鞋轫步 确定F1的撼闻已经整合硎寄主植物的溅因组中。 3对部分通过PcR检测的檬株进行一步法RT_PcR检测，在80个被检测单株中， 每令婆椿部获褥了籍舞瓣扩’璜蘩荣，繇浚初步确定瓣瓣基因袁鬻至獯耪体瘫褥 到表达。 荧键诿：黻海芥菜：藤蛋自酶抑制裁；激位渗入法 study study on Introduction of M¨star’Ibpsin Inhibitor gene，撑f珏 l珏垂。众霸睡参撕豳￡磊8￡赫捍瘁 Abstract 7l氇e pesls瓤a m拄l牲lk|”f ll，；撞}eslf秘l拄|h。y；#ld al{d quallly of cf{’|堪．辙)囊ls g}e疆l importance ror a掣icunure production that breedjng new cultjvars whicb 愆s；slanee|o p。sl，h{l沁c毛)弼mon mel孙泰。f辨辩一强sisl矗粒eeeding a糙rcsl嘣ned greaIly because the brcedjng weck is long is Iim“ed and the pesl·fe《s|anc#me曲3nism afe搬》￡clea￡Bu{{h站迷u主ckly de张b梦men|of plan量genetie engineering pmVides new and powerful method for breeding pest_rcsistance eultiVars，Muslar lfypsin inhibitor蛔s bcen j∞bled ffom white mus￡af seeds，it signjficantly afkcted the actiVity of oVeraIl digestiVe prolease in the gut of ￡妒f如∥孽瑚再舻默呈a绀als．The辖t’ofe，麟i2 is thought be good can出da￡e fof enhancing Pcst rcsitance in pIant． In lhis reascrch，the mti2 encodin鐾cDNA scquence lhal recombinatcd in PKYLX一71 has been trans重ef into arabidopsis by fn p函雄f棹infiltratio