课件：胰腺癌细胞系的表型及基因型介绍.ppt

PPT制作：杨金收 胰腺癌细胞系的表型及基因型介绍 胰腺癌细胞系能够用来进行胰腺癌相关实验的原因 （1）胰腺癌中常见的四种基因（K-ras、p16、p53、Smad4）突变的比例和胰腺癌细胞系中其突变的比例接近； （2）胰腺癌细胞系不同的表型和基因型代表胰腺癌不同的亚类； 利用胰腺癌细胞系进行机制推理和因果实验，比如不同特定蛋白的表达和肿瘤生长、侵犯、转移之间的关系，以及化疗耐药实验。 几种常见胰腺癌细胞系的来源 AsPC-1细胞： 源自胰头癌原发肿瘤 有转移，转移至腹部器官、腹水 分泌：黏蛋白、CEA BxPC-3细胞： 源自胰体癌原发肿瘤 无转移 分泌：CEA、CA199、黏蛋白等 裸鼠移植生长类似患者原位肿瘤 Capan-1细胞： 源自胰头癌肝脏转移灶 有转移，转移至区域淋巴结、肝脏等 分泌：黏蛋白 Capan-2细胞： 源自胰头癌 有侵犯，浸润十二指肠壁远端 CFPAC-1细胞： 源自胰头癌肝脏转移灶（并发囊性纤维化） 有转移，广泛转移至肝脏 CFTR突变：引起①先天性胰腺炎②新发胰腺癌危险因素（存在争议） HPAC细胞： 源自胰头癌 分化稳定、良好 HPAF-II细胞： 源自胰腺癌腹水癌细胞（转移至肝脏、隔及淋巴结） 几种常见胰腺癌细胞系的来源 Hs 766T细胞： 源自胰腺癌淋巴结转移灶 MIA Paca-2细胞： 源自胰体尾癌原位肿瘤 有侵犯，浸润至主动脉周围 无表达大量CEA且ALP阴性 PANC-1细胞： 源自胰头癌原位肿瘤 有转移，转移至胰周淋巴结 未检测到CEA SU.86.86细胞： 源自胰头癌肝脏转移灶 有转移，广泛肝脏转移 细胞的粘附性 细胞的粘附性是通过细胞外基质和细胞表面分子接触介导的： 纤连蛋白，一种发现于基底膜和结缔组织的糖蛋白 I型和IV型胶原蛋白，发现于组织间质和基底膜 层粘连蛋白，基底膜中主要的非胶原蛋白 相关研究： Capan-1比Mia-paca-2更易连接到I型胶原蛋白 Capan-1和Mia-paca-2对层粘连蛋白的粘附性无明显差异，有研究也表明Capan-1稍逊 Bxpc-3和panc-1对I型胶原蛋白粘连性近似 Bxpc-3和panc-1对层粘连蛋白粘附性近似，有研究也表明，Bxpc-3更强 细胞的粘附性 影响研究差异的变量： 细胞定量技术的不同，如分光光度法和光学显微镜的差异 细胞培养条件 对细胞外基质的处理方法 对研究者建议： 注意引用既有的研究，认真阐明不同细胞系的黏附特性 细胞的迁移和侵犯 相关实验方法： 细胞增殖实验 MTT CCK8 细胞迁移实验 transwell using Boyden chambers wound-healing cell migation assay（细胞划痕实验） 细胞侵犯实验 transwell（特定基质） ***特定基质：人工基质胶（包括层粘连蛋白、IV型胶原蛋白、巢蛋白、硫酸肝素） 细胞的迁移和侵犯 细胞迁移性在癌细胞转移中发挥重要作用。 细胞迁移相关研究： Panc-1（多是单细胞迁移）比bxpc-3（多是整个细胞团的迁移）有5倍的能动性 Panc-1细胞在I型胶原蛋白transwell中比bxpc-3能动性更好 HPAF-II比bxpc-3能动性好 高侵犯癌症的患者发现时，多是晚期转移性疾病，严重影响患者的预后。 细胞侵犯相关研究： Capan-1和mia-paca-2在人工基质胶中有相似的侵犯特性 Bxpc-3比mia-paca-2有更强的侵犯能力，有研究也表明二者近似 Panc-1比mia-paca-2有更强的侵犯能力，有研究也表明mia更强 细胞的迁移和侵犯 影响研究差异的变量 检测侵犯性能的试剂 细胞培养条件 细胞培养时间 细胞定量技术 对研究者建议 在得出实验中侵犯能力的的结论时，首先阐明本实验细胞系的侵犯特点。 血管生成能力 肿瘤微血管密度（TMVD）是至关重要的肿瘤发展和患者生存的预测指标，在大部分肿瘤中（如乳腺癌、前列腺癌）介导心血管的生成。肿瘤的增殖和心血管的生成密切相关，其促血管生成因子多于抗血管生成因子，其中的促因子如血管内皮生长因子和胰腺癌的TMAD密切相关。促血管生成因子的高表达不仅促进中肿瘤血管生成，而且能够促进肿瘤细胞有丝分裂的进行。 促血管生成因子： 细胞因子，如IL-1α、IL-8 趋化因子， 酶类 其他肿瘤产物 COX-2在促进肿瘤血管生成中的作用： 促进AA转化为PGE2，PGE2为一种血管生成因子 PGE可激活NF-kB NF-kB可以促进COX-2的转录和翻译 IL-8可以介导细胞增殖和血管内皮细胞趋化运动，从而促进肿瘤的生长 血管生成能力 相关研究： BxPC-3, Capan-1,Capan-2 and HPAF-II可表达COX-2， 而AsPC-1, MI