课件：流行性感冒(教-04).ppt

对流感病毒致病性的鉴定，目前国际上已认可的方法有： 　　（一）将感染病毒的鸡胚尿囊液作10—1稀释后，经静脉接种8只4～8周龄的敏感鸡，每只0.2ml。在接种后10d内，死亡数量在6只或6只以上时，该病毒为高致病力禽流感病毒。 　　（二）被分离的病毒致死1～5只鸡，但不是H5或H7亚型的病毒，则将病毒接种于细胞上，如病毒在缺乏胰蛋白酶时不能在细胞上生长，不能形成细胞病变，则该病毒为非高致病力禽流感病毒。 　　（三）被分离的病毒能致死1～5只鸡，而且是H5或H7亚型，则如果病毒能在缺乏胰蛋白酶的细胞上生长，或其血凝素多肽经氨基酸序列分析，与高致病力禽流感病毒的序列相似，则被分离的病毒也被认为是高致病力禽流感病毒。 　　除此之外，有些国家以静脉接种指数（IVPI）大于1.2，或仅凭H5或H7亚型病毒血凝素多肽氨基酸序列与高致病力禽流感病毒相似为标准，而将被分离病毒判为高致病力禽流感病毒。 以上两种血清学检测方法的比较： 琼脂扩散试验可检测A型流感病毒的共同抗原，如被检血清与已知AI沉淀抗原呈阳性反应，即可判定禽群受禽流感感染，但它不能分辨是新近的感染还是过往的感染，也不能分辨抗体是野毒感染还是接种禽流感疫苗引起的。但在没有接种过禽流感疫苗的地区，琼扩试验在流行病学的调查方面仍具有简便、特异性强的优点，若在广泛接种过疫苗的地区，则意义不大。 血凝和血凝抑制试验在对新分离病毒的鉴定，尤其是HA亚型鉴定方面有重要意义，但由于流感病毒的HA亚型多，所以一般不用于对疾病的诊断上，而在已接种禽流感疫苗的地区，HI试验则可用于对免疫效果的监测上。 　　其他检验方法，例如荧光抗体技术、中和试验（NT）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、补体结合反应、免疫放射试验和RT-PCR等均可用于禽流感的诊断。 防制 动物患流感康复后，虽可获得对同一亚型的短期免疫力，但不能抵抗其他亚型的感染，因为亚型之间无交叉免疫力。在自然界A型流感病毒的亚型众多，而且可能经常发生变异，对猪禽来说，依靠少数几个亚型的疫苗往往不能奏效，因此，一般性的兽医卫生措施是目前防制本病的主要手段，必要时可对疫区实行封锁措施。 治疗本病尚无特效药物。一般用清热、抗病毒、干扰素诱生的中药制剂，以及干扰素、金刚烷胺、病毒唑等中西药相结合的治疗方法。 对病人应及时隔离治疗，复方金刚烷胺片有防治效果。老人心、肺、肾病患者或代谢障碍病人可接种同型的灭活疫苗，如在接种疫苗后再服金刚烷胺片，则效果更好。 症状和病变禽：禽的流感又称鸡瘟(Fowl plague)。家禽中以鸡、火鸡最为易感，其次为鹅、鸭等。 急性病例体温迅速升高(达41.5℃以上)，拒食，病鸡很快陷于昏睡状态。冠与肉髯常有淡色的皮肤坏死区。鼻有粘液性分泌物。头、颈常出现水肿。腿部皮下水肿、出血、变色。病程往往很短，常于症状出现后数小时内死亡。 病变表现为心表面、肌胃周围脂肪组织、体腔浆膜面和腺胃粘膜面有点状出血。某些病例的心包裹有浆液纤维素性渗出物。主要器官可能有出血点和混浊肿胀。 诊断 根据病的流行特点、临诊表现和病理变化可作出初步诊断。但需与类似疾病作区别诊断，如猪流感应与猪肺疫、急性猪气喘病，鸡瘟应与鸡新城疫、禽霍乱作区别诊断。 对高致病力禽流感，根据病鸡已有较高的鸡新城疫抗体而又出现典型的腺胃乳头、肌胃角质膜下出血的病变，以及心肌、胰腺坏死等，鹅和鸭的头肿、眼的血样渗出物和典型的神经症状等可作出初步诊断。  但确诊应进行实验室诊断。 分离与鉴定:在动物发热初期采取新鲜鼻液，或用灭菌棉棒擦拭鼻咽部分泌物，立即接种于孵化9~11d的鸡胚尿囊腔或羊膜腔内，或接种于马肾、鸡胚细胞培养物上分离病毒。培养5d后，取羊水或细胞培养液作血凝试验。阳性则证明有病毒繁殖，再以此材料作补体结合试验(决定型)和血凝抑制试验(决定亚型)。 禽流感的分离与鉴定： 可选取病死禽的气管、心、肝、脾、胰、脑，以及直肠、泄殖腔和喉气管棉拭子等病料。 按1：5比例加入生理盐水，制成匀浆，离心取上清液，加入庆大霉素、制霉菌素等或用过滤器除菌，经尿囊腔接种SPF鸡胚或非免疫鸡胚，每胚0.2ml。置37℃培养，弃去24h前死亡胚，24h后死亡胚经冷冻后取尿囊液待检，对第5d尚未死亡的胚，也作冷冻处理后收取尿囊液。收取的尿囊液，一部分作HA检测，另一部分盲传，如连续盲传2～3代HA仍呈阴性即可放弃。 　　收获鸡胚尿囊液，检测对鸡红细胞的凝集效价（HA），如HA呈阳性反应，则分别用AIV、NDV、减蛋综合征的抗血清再作HI检验，如其HA活性不能被NDV抗血清、减蛋综合征抗血清所抑制，但能被禽流感阳性血清抑制，则