HPLC法同时测定结痂酊中三种有效成分的含量摘要目的建立高效液.docVIP

HPLC法同时测定结痂酊中三种有效成分的含量 摘要 目的：建立高效液相色谱法测定结痂酊中三种有效成分的含量。方法：采用超声提取法制备供试品。采用Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离，以乙腈-0.3%磷酸水为流动相进行梯度洗脱，体积流量为0.80mL/min，检测波长276nm，柱温为30℃测定结痂酊中儿茶素、黄芩苷、小檗碱的含量。结果：儿茶素在100~800μg/mL（0.9997）、黄芩苷在15~120μg/mL（0.9996）、小檗碱在7~56μg/mL（0.9995）有良好线性关系，平均回收率分别是99.67%(RSD为1.01%，n=6)，98.7%(RSD为1.93%，n=6)，100.5%(RSD为2.88%，n=6)。结论：本实验建立高效液相色谱法简单、准确、重现性好，可用于结痂酊中儿茶素、黄芩苷、小檗碱的含量测定。 关键词：结痂酊；儿茶素；黄芩苷；小檗碱；HPLC Key words:Incrustation tincture; atechin; baicalin; berberine, HPLC ABSTRACT:AIM To establish a HPLC method for determining three kinds of effective components in incrustation tincture. METHODS The ultrasonic extraction method was used to extract three components from the sample. A column Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm) was used with a mobile phase consisted of acetonitrile-0.3%phosphoric acid solution in gradient elution mode. The floe rate was 0.8 mL/min. The detection wavelength was 276nm. The column temperature was set at 30℃.RESULTS Atechin,baicalin and berberine were linear within the ranges of 100~800μg/mL(0.9997),15~120μg/mL(0.9996) and 7~56μg/mL(0.9995),respectively. The average recoveries were 99.67%，98.7% and 100.5%, respectively. CONCLUSION The method is simple, precision, reproducible and can be used for the quality control of incrustation tincture 结痂酊是由儿茶、黄芩、黄柏各100g，冰片30-50g组成[1] ，具有清热收敛，止血敛疮，生肌定痛的功效，临床上常用于治疗烧烫伤。儿茶是豆科金合欢属的植物，药理功效是收湿生肌敛疮，在临床上主要用于治疗溃疡，皮肤湿疹，外伤出血等[2]，近年来也常用于抗氧化[3]，抗菌。黄芩为唇形科植物，有解热抗炎作用、抗过敏、抗内毒素及抗焦虑[4]的功效.黄柏是芸香科植物，药理作用主要有清热燥湿，泻火解毒，抗病原微生物，抗炎，抗变态反应，对湿疹，烫伤，褥疮，昆虫性皮炎也有较好疗效[5]。结痂酊中儿茶素、黄芩苷、小檗碱含量测定的方法未见报道，本研究建立了高效液相色谱法同时测定结痂酊中儿茶素、黄芩苷、小檗碱含量。 1 仪器与试剂 1.1仪器 高效液相色谱仪-UV3000紫外可见检测器-P3000高压恒流泵（北京创新通恒公司）；FA1004分析天平 (上海天平仪器总厂)；KQ-600DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）;2100A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂） 1.2试剂 乙腈（色谱纯,sigma公司）；磷酸（分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；甲醇（分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；儿茶素标准品（批号110877-200001，中国药品生物制品检定所）；黄芩苷标准品（批号 110715-201016，中国药品生物制品检定所）；小檗碱标准品（批号 110713-200911，中国药品生物制品检定所）； 2方法和结果 2.1 色谱条件 Kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm) 色谱柱；以乙腈-0.3%磷酸水为流动相进行梯度洗脱，梯度洗脱表见表1（采集时间为45min）；体积流量为0.8