实验-6-壮苗生根培养.pptVIP

植物组织培养实验技术 北京林业大学 2015-5 实验六 壮苗与生根培养 一 实验目的： 1、了解组培苗生根培养的方法 2、了解在生根培养过程中易出现的问题 二 实验内容 1、组培苗根的诱导 2、影响生根的因素 （1）组培苗根的诱导 根的诱导方法： ①将新梢基部浸入50~100×10-6 IBA溶液中处理4-8h； ②在含有生长素的培养基中培养4-6d； ③直接移入含有生长素的生根培养基中。 其它诱导生根方法： ①延长在增殖培养基中的培养时间； ②减少细胞分裂素的用量(将增殖与生根合并为一步)； ③切割粗壮的嫩枝在营养钵中直接生根，切割下的插穗 可用生长素溶液浸蘸处理，此种方法只适于一些容易生根的植物。 基本培养基： MS、B5、White 激 素： NAA、IAA和IBA，0.1-10mg/l 碳 源： 蔗糖，1.0-2.5% 培养基硬度： 适当减少琼脂用量 其他添加物： 活性碳 ，1%左右 光 照： 3000-10000lux ，全光或16h/d 不定根生长 （2）影响生根的因素 1、培养物久不生根，基部切口没有适宜的愈伤组织 ?改进措施： 选用适宜的生长素或增加生长素用量； 适当降低无机盐浓度； 改用滤纸桥培养生根等。 可能原因： 生长素种类、用量不适宜； 生根部位通气不良； pH值不适； 无机盐浓度及配比不当。 2、愈伤组织生长过快、过大，根茎部肿胀或畸形，根并联或愈合。 可能原因： 生长素种类不适，用量过高，或伴有细胞分裂素用量过高。 ?改进措施： 调换生长素种类或几种生长素配合使用，降低使用浓度，附加VB2等减少愈伤； 三 实验材料 生根培养材料：金钻蔓绿绒培苗 （Philodendron’con-go’） 五 实验步骤 选取培养瓶中较健壮的植物材料 将材料进行剪切，适当保留叶片 修剪其根部露出新鲜组织 接种入生根培养基中，每瓶接种3-4棵 放入培养室培养 下次实验内容： 炼苗与移栽 本次准备工作： 各组将生根苗放至人工气候箱中进行炼苗 清洗蛭石盘，然后将蛭石均匀填入蛭石盘内，用3‰KMnO4喷淋消毒，下次移栽前用清水冲洗干净。 三个组共同搭建一个小拱棚，共用一个蛭石盘，配制2000ml 3‰KMnO4溶液 。 本次实验报告要求 试管苗生根的主要方式 在诱导试管苗生根时需要注意哪些问题 今次第三组值日，实验结束后清理、打扫接种室与综合实验室。 实验结束后，每小组将工具整理好，放回至各组实验台，清理实验过程中的废弃物，清洁超净工作台。