实验四 CUJ-20C发酵设备的模拟操作.pptVIP

实验四 CUJS-20C型发酵设备的模拟 一.实验目的 1. 学习并掌握自控发酵罐的空罐消毒的原理及操作步骤。 2.学习并掌握自控发酵罐的实罐灭菌的原理及操作步骤。 二.实验原理 1. 空罐消毒 发酵罐在使用前均需要先进行空罐消毒，空罐消毒是将蒸汽直接送入罐内，实施消毒灭菌（主要目的为灭掉各角落的微生物），灭菌时两个监控口均用塞子塞住，使整个罐内压力达0.1－0.12MPa，时间为30－50min 2. 实罐灭菌 实罐灭菌是在加入液体培养基后，实施的一种灭菌，本实验是模拟实验，所以用水代表液体培养基，加量一般为75%－80%，本实验加12 L，其余用冷凝水补（因加热过程中有大量冷凝水生成）。 将温度测试阀安装好，然后将蒸汽送入发酵罐的夹层预热　到80 ℃，再加热灭菌， 汽压保持在0.1～0.12MPa 30min。待罐中水温为50℃灭菌结束，关闭蒸汽阀。 然后打开冷水阀，进行冷却至罐中温度为35℃时，无菌操作接入菌种，进行发酵。 三.实验器材 20L自控发酵罐 空压机及储气罐 蒸汽发生器 棉花，工业酒精，打火机等。 四.实验操作步骤 （一）准备工作: 1. 空气源的检查，并将空压机打开，使气压达到0.2～0.25MPa。 2. 管道、阀门的检查，关闭所有阀门，打开蒸汽发生器，使汽压达到0.12～0.14MPa。 3. 电器仪表的检查，关闭控制台电源。 （二）空罐消毒 1.打开排水阀F33，蒸汽阀F5（加速夹套中水的排出），排尽夹套中的水后即关闭F5. 2.打开F4、F22（排尽蒸汽管中冷凝水），然后将F22转为微开；稍开F21，微开F14使蒸汽徐徐进入发酵罐；对发酵罐进行空消。 3.注意在升温过程中，需将“加热”、“冷却”、“pH值调节”、“消泡”、“流加”开关置于“关”的位置或将控制器与“停机” 状态。否则当温度设定值设定在培养温度时，会自通冷却水，影响升温速度，同时也浪费蒸汽。 4.在灭菌过程中，应时刻注意罐压，并控制在0.11~0.12MPa之内，请勿超压。罐压的控制通过调节阀门F4和F14来实现。 5.空消时间一般为30~50分钟。到时间后，关闭F4、F14。当罐温降至80℃以下时，方可打开F22,排尽发酵罐内的冷凝水后，关闭F22、F21。 6.当蒸汽阀F4关闭后，发酵罐内的压力会迅速下降，为防止发酵罐内产生负压，必须微开F13,并调节F14,使罐压保持在0.03～0.05MPa之间。 （二）实罐灭菌 1.检查夹套排水阀F33是否打开，夹套水是否排尽（可利用F5加压排夹套中水）。 2.夹套预热：关闭F34、F31（不进冷水）,打开F5、F33（蒸汽加热）,接通电源，开电源开关，手动开启搅拌电机，调节电机转速至150rpm左右（预热均匀、快速），进行慢速搅拌。 3.发酵罐内的温度达到80℃左右时关闭与调小F5，打开F4、F22，排尽蒸汽管中冷凝水后即关闭F22；稍开F21，使蒸汽徐徐进入发酵罐；继续升温。 4.此时应关闭进气阀F13，将排气阀F14调为微开。 5.当培养液温度达到95~100℃后，可停止搅拌（因物料已经沸腾，不需搅拌）。当发酵罐内温度达到灭菌要求时（ 121 ℃ ），阀门F4、F14处于微开状态；时刻注意罐压，并控制在0.1～0.11MPa之内，严禁超压。 罐压的控制通过调节阀门F5（可关）、F4、F14来实现。 6.注意在升温过程中不要开冷却开关，否则当温度设定值设定在培养温度时，冷却水管中会自通冷却水，不仅会影响升温速度，浪费蒸汽，更重要的是会引起冷凝水过多，引起培养液浓度变化或不能达到灭菌温度。 实消时间一般为30分钟。到时间后，关闭F4、F5、F14，自然冷却10min左右。 7.通冷却水进行冷却，操作如下：关闭夹套排水阀F33，按冷却键，至手动冷却状态；或调整温度设定值，按冷却键至自动状态；此时起即进入控温状态。 8.当蒸汽阀门关闭以及通冷却水后，发酵罐的罐压将迅速下降，当罐内压力降至0.03MPa时，必须间隙开启进气阀F13，让空气进入发酵罐内，并保持压力在0.03~0.05MPa之间。 9.当罐内温度降至70℃以下时，调节搅拌电机的调速器，慢速搅动培养基，加快冷却速度；同时可稍开进气阀F13和调节排气阀F14使罐压保持在0.03~0.05MPa之间。 发酵过程的操作 1.接种　接种方法可采用火焰接种法。 火焰接种法：在接种口用酒精火圈消毒，然后打开接种口盖，迅速将接种液倒入罐内，在把盖拧紧。2.罐压　发酵过程中须手动控制罐压，即用出口阀控制罐内压力。调节空气流量的，须同时调节出口阀，应保持罐内压力恒定大于0.03Mpa。 3.溶解氧（DO）的测量和控制 (1) 溶解氧的标定： 在接种前，在恒定的发酵温度下，将转速及空气量开到最大值时的溶解氧DO值作为100%。 (2)