一株巨大芽孢杆菌J1的生胞培养及优化-江苏农业科学.PDFVIP

江苏农业科学　２０１４年第４２卷第１０期 — ３５９— 司云龙，任丽丽，李玉玺，等．一株巨大芽孢杆菌Ｊ１的生胞培养及优化［Ｊ］．江苏农业科学，２０１４，４２（１０）：３５９－３６１． 一株巨大芽孢杆菌Ｊ１的生胞培养及优化 １ １，２ １，２ １ 司云龙 ，任丽丽 ，李玉玺 ，陈　阳 （１．滨州学院生命科学系，山东滨州２５６６０３；２．山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心／滨州学院，山东滨州２５６６０３） 　　摘要：以巨大芽孢杆菌Ｊ１为材料，利用溶磷圈法测定了菌株的解磷能力，优化了菌株的最佳发酵条件、最适培养基。 结果表明，此菌株溶磷效果明显；此菌株生长的最适培养时间为２８ｈ，最适接种量为６．７％，最适ｐＨ值为８．５；最佳碳源 为玉米粉与葡萄糖的复合碳源，最佳氮源为大豆粉与硫酸铵的复合氮源。摇瓶培养的接种量为６．７％，ｐＨ值为８．５， ２５０ｍＬ三角瓶中最适装液体积为３０ｍＬ，培养温度为３０℃，培养时间为２８ｈ，最适宜转速为１８０ｒ／ｍｉｎ的摇瓶培养条 件下，巨大芽孢杆菌活菌数各影响因素最佳组合为：玉米粉２０ｇ／Ｌ，葡萄糖５ｇ／Ｌ，大豆粉７．５ｇ／Ｌ，硫酸铵０．３３ｇ／Ｌ，各 因子对巨大芽孢杆菌活菌数的影响由大到小依次为：硫酸铵浓度＞玉米粉浓度＞葡萄糖浓度＞大豆粉浓度。 　　关键词：巨大芽孢杆菌；培养基；芽孢率；氮源；碳源；培养条件 　　中图分类号：Ｓ１４４．９　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１４）１０－０３５９－０３ 　　植物生长发育过程中，磷元素以多种方式参与生物体内 １．１　材料 ［１－２］ 的代谢过程，是植物不可缺少的大量元素之一 。土壤中 巨大芽孢杆菌Ｊ１由山东京博控股股份有限公司技术中 的磷元素主要以难溶磷酸盐的形式存在，可溶性磷含量很少。 心生物化工研究所提供。 据统计，世界土壤的平均含磷量约为０．０４％，我国土壤的平 １．２　培养基 均含磷量为 ０．０２％ ～０．１％，南方酸性土壤含磷量低于 摇瓶基础培养基：玉米粉 ３０ｇ，大豆粉 １５ｇ，ＫＨＰＯ ２ ４ ［３－４］ ０．０４％ 。研究发现，土壤中存在解磷微生物，它们能够将 ２．０ｇ，ＭｇＳＯ ２．０ｇ，ＣａＣＯ １．５ｇ，ＭｎＳＯ ０．０５ｇ，ＨＯ ４ ３ ４ ２ 磷酸盐转化为可溶性磷供植物吸收利用，解磷菌还可以产生 １０００ｍＬ，ｐＨ值为 ７。平板培养基：蛋白胨 １０ｇ，氯化钠 有机酸、生长素、抗生素等物质，刺激作物生长，抑制病原菌生 ５．０ｇ，牛肉膏粉３．０ｇ，琼脂 １５ｇ，ＨＯ１０００ｍＬ。蛋黄培养 ２ ［５－９］ 长，改善土壤微环境，从而更有利于植物生长发育 。目前 基：将５０％的蛋黄液按照６％的比例加入平板培养基中。 对磷细菌的研究仅局限于菌种分离选育及作用效果比较方 １．３　方法 面，对于影响磷细菌生长的因素研究较少［１０－１３］。微生物种类