222动物细胞融合与单克生隆1抗体.pptVIP

学校：灵台一中 姓名：徐改秀 引入新课 1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什么用途呢？这就是今天我们这节课学习的内容。 意义及用途 ⑴打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ⑵广泛应用多个学科领域； ⑶重要用途：制备单克隆抗体。 6.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 （一）、单克隆抗体的概念 思考： ①对小鼠做何处理？ ②细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？ ③杂交瘤细胞的特点：既能在体外大量 ，又能产生 。 ④产生抗体的杂交瘤细胞如何筛选出来的？ 右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？　　。原因是　　 　 　。　（2）图中②为　　　过程，常用_ 　　　　作为诱导剂。该细胞继承了　 　 　，因此不仅能分泌　 　　 ，还有_ 　　 　　本领。（3）该方案的目的是　　 。 * 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 生物法： 灭活的病毒 （丧失感染性、保留抗原结构） 过程： 2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？ 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法 动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。 １、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 　　 讨论 不能，只能得到杂交细胞 4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导 ５、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？　 讨论 相同，都是细胞膜的流动性 6、为什么要用灭活的病毒？ 病毒一般对生物体是有伤害的。 7、动物细胞融合有什么意义？ 突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。 仙台病毒 物理或 化学方法 丧失感染活性 保留融合活性 过程 用途 诱导方法 细胞融合的过程 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性、细胞的全能性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理、化学方法 物理、化学、生物方法 获得杂种植株 制备单克隆抗体 细胞融合， 植物组织培养 细胞融合 1 抗体是由何种细胞产生的？ 2 抗体是如何产生的？ ？ 二、单克隆抗体 ？ 3 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。 4 B淋巴细胞与抗体的关系 　⑴．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。 　⑵．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可 达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　⑶．但每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 　⑷.在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。　 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 （二）、单克隆抗体的制备 1、设计方案： 创始人：米尔斯坦 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合 单克隆抗体 既能产生特异性抗体，又能大量繁殖 1、设计方案： 动物细胞融合技术 B 、BB 、B瘤 、瘤瘤 、瘤 只有杂种细胞才能活 动物细胞培养 2.单克隆抗体制备过程 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 注射特定的抗原蛋白 五种（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨－骨、杂交瘤细胞）其中三种融合细胞。 繁殖 特异性抗体 抑制骨髓瘤细胞的DNA复制。 与常规抗体相比，单克隆抗体特异性强，灵敏度高，产量高，优越性十分明显。 应用： 特点： １可用于作为诊断试剂：有准确，高效，快速的优点 ２可用于疾病治疗 ３可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的“生物导弹”）　“生物导弹”＝抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。） （三）单克隆抗体的应用 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 ——灭活病毒 一个新细胞——杂交瘤细胞