酒石酸布托啡诺作用靶点相关基因表达的研究-麻醉学专业论文.docxVIP

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河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则, 研究一羔t嘱孙师签蒯学院领导躲 订年多A k El 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:蔓I硐考殳导师签名研究生签名:夕\、dJ24霄爻导师签名 厶摹年/R弛El 中文摘要酒石酸布托啡诺作用靶点相关基因表达的研究 中文摘要 酒石酸布托啡诺作用靶点相关基因表达的研究 摘 要 酒石酸布托啡诺是近几年国内才用于临床外科的阿片 类镇痛药,是一种混合型阿片受体激动一拮抗剂。布托啡诺 具有良好的镇痛和镇静作用,而不良反应的发生率低于单纯 的u受体激动剂吗啡。目前所了解的布托啡诺靶受体蛋白功 能及基因信息还远远不够,有待于进一步深入研究。国内外 有关布托啡诺静脉注射体内试验,作用靶点相关基因表达的 研究报道较少。应用RT-PCR技术检测布托啡诺作用靶点相 关基因表达的研究迄今尚未见报道。 目的:本研究通过静脉注射布托啡诺后,采用RT一冗R 方法检测大鼠脑皮质、海马、尾壳核和脊髓阿片受体K、6 和u基因的表达。比较脑和脊髓作用靶点调适幅度的差异, 为进一步深入研究布托啡诺中枢镇痛和外周镇痛的分子机 制提供实验资料。为阐明布托啡诺镇痛作用靶点分子作用机 理提供新的科学依据。 方法: 1大鼠热甩尾试验TFL(tail.fliching latency)测痛反应。20 只6.7周雄性Sprague.Dawley大鼠(236.2609),随机分成 两组,每组10只,均行自身对照实验。将鼠尾从尖端起约 5cm长浸入水浴中(50±l℃),计数从鼠尾浸入到完全离开 水面时间,作为基础痛阈,于布托啡诺给药后再行同样测量 作为反应痛阈。以20s作为终止时间以防止组织损伤。给药 前测定基础值TO,然后实验组B组经尾静脉注射布托啡诺 0.2mg·kg~:对照组N组注射等容量生理盐水,每5min观 察并记录TFL,直到给药后4h。 中文摘要2 中文摘要 2 RT--PCR试验。40只雄性Sprague-Dawley大鼠,均 采用尾静脉注射,随机分为5组:空白对照组C0; 1h、2h 对照组(CI C2组n=8)注射生理盐水; 1h、2h布托啡诺组 (B1 B2组n=8)0.2mg·kg‘1注射酒石酸布托啡诺。分别于 注射后1h、2h处死动物。立即提取大鼠脑皮质、海马、尾 壳核和脊髓的总RNA,以RT-PCR技术扩增目的片段,用凝胶 成像分析系统测定光密度值分析RT-PCR产物,以内参 B—actin光密度值标化K、6和Il的光密度值,得到K、 6和u RT—PCR产物的相对含量。以反映阿片受体K、6 和u基因的表达水平。 结果: 1甩尾试验结果布托啡诺可产生较强的镇痛作用(用 药后20—80min镇痛效果最强,甩尾潜伏期与给药前相比有显 著差异(18.2±2.Os对4.91±1.41s,pO.01)。同时,给药前测 痛过程中大鼠表现极为紧张,有躁动、嘶咬、嘶叫发生;而 从给布托啡诺5min后直到试验结束大鼠表现都极为温顺, 提示布托啡诺可以产生较强的镇静作用。 2 RT-PCR结果 与空白对照组比较,布托啡诺注射后lh,k受体在脑皮 质、尾壳核、脊髓中的表达升高;u受体在皮质、海马、尾 壳核表达均降低,以皮质最为显著。 结论:酒石酸布托啡喏可以产生较强的镇痛效果,其作 用的产生可能与三种受体的交互作用有关,主要激动k阿片 受体,同时对|I和6受体有一定拮抗作用。 关键词: 酒石酸布托啡喏;阿片受体;镇痛;逆转录 中文摘要一聚合酶链反应 中文摘要 一聚合酶链反应 英文摘要Expression 英文摘要 Expression of target genes after the acute inj ection of Butophanol Tartrate ABSTRACT Butorphanol tartrate is a mixed agonist—antagonist opioid analgesic agent which has been applied to treat pain recently in China.Butorphanol possesses favourable a

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