欧洲血液学杂志TEC与BTK抑制剂出血副作用无关.PDFVIP

欧洲血液学杂志：TEC 与 BTK 抑制剂出血副作用无关 Tec 酪氨酸激酶是一种胞质内的蛋白酪氨酸激酶，在淋巴细胞发展和活化阶 段，Tec 激酶在抗原受体的下游传导路径中发挥着重要的作用。在 BTK 抑制剂 中，无论是 First in Class 的 Ibrutinib 还是最新的 Acalabrutinib ，亦或是尚 在临床试验中的 Zanubrutinib 都显示出一定的抑制作用。一些宣传认为 TEC 是 BTK 抑制剂出血副作用的主要原因，对其相对抑制力较弱的 BTK 抑制剂， 其出血的副作用越小。事实真是如此吗？TEC 真的与出血具有直接的联系吗？ 近期，欧洲血液学杂志发表了最新的人体细胞研究，结果与体外研究结果恰恰 相反，TEC 抑制强度与血小板聚集力没有直接关系，而 BTK 抑制的强度才与此 有关 ，如果没有出血的副作用，可能对 BTK 的抑制效果反而需要打个问号 了…… 早先的体外研究 BTK 与血小板凝聚相关 早在 1998 年，Current Biology 杂志就发表研究 （Current Biology 1998, 8:1137– 1140） ：BTK 参与血小板活化过程，是胶原受体糖蛋白（GP）IV 活化的上游通 路。且通过实验显示 BTK 与胶原蛋白诱导的血小板凝聚相关。 2003 年，BLOOD 杂志发表相关研究(Blood. 2003 Nov 15;102(10):3592 -9) ，选 取 XLA （因BTK 发生突变造成的无丙种球蛋白血症）疾病患者的血小板以及 BTK-敲除的小鼠血小板进行检测，结果显示血小板聚集量相对正常对照组明显 减少，且与其对应的是低浓度的胶原蛋白，但在高浓度胶原蛋白下，血小板聚 集水平能够恢复接近正常 ： 若 BTK 敲除 ： BTK↓ → 胶原蛋白↓ → 血小板聚集↓ 若增加胶原蛋白 ： BTK↓ → 胶原蛋白↑ → 血小板聚集↑ 因此进一步验证： BTK 通过 GP IV 通路，控制胶原蛋白，进一步控制血小板聚集 BTK → 胶原蛋白 → 血小板聚集 BTK/TEC 与血小板凝聚 众所周知 BTK/TEC 有协同作用，那两者对血小板聚集是否也有协同作用。在 Blood 研究中发现，若小鼠的 BTK/TEC 同时被敲除，其血小板聚集能力确实 显著下降，胶原蛋白需要继续升高至 10μg/ml 才能让血小板聚集能力开始有所 恢复。因此认为在小鼠体内，TEC 可部分代偿 BTK 功能的功能，并就此推断对 TEC 抑制会造成血小板聚集能力更严重下降。 BTK/TEC 同时敲除的大鼠，其血小板凝聚力进一步下降 体外研究缺陷： ● 只评估 IC50 在体外进行血小板化验来测量，并且没有考虑到每一种 BTK 抑 制剂所表现出的不同临床意义的人类血浆暴露水平（如一些 BTK 抑制剂需多次 服用，导致在血浆中暴露的水平更高）。 ● 对 BTK 抑制剂所定义的体外潜能进行简单的比较，可能会导致在临床环境 中得出不准确的结论。 本次欧洲血液学杂志针对体外研究的缺陷，进行了人体细胞的研究，主要针对 三个方面： 1、激酶的选择性，寻找是否具备 BTK 选择性更强的抑制剂 2、靶标的选择性，检验哪个 BTK 抑制剂具有较强 OFF-TARGET 3、出血的副作用，是否是 TEC 抑制造成了使用 BTK 抑制剂出血的副作用 欧洲血液学杂志发表研究 1、激酶检测 BTK 抑制剂 ： ibrutinib, acalabrutinib, tirabrutinib, RN486, and zanubrutinib 检测方法 ： 1、Caliper LabChip ：微流体移动移位分析 2、HotSpotSM：放射性同位素过滤结合试验 3、LanthaScreen™ ：荧光共振转移测试 4、KINOMEscan：活性位点定向检测分析 应用四种不同的检测方法检测相应 BTK 抑制剂在对于 BTK 及 TEC 的抑制强度 检测结果 ： 不同分析平台显示，其结果也并非得到一致性的结果，在 BTK 抑制能力方面， 伊布替尼较 Acalabrutinib 在三个平台上均体现出其对 BTK 强大的抑制能 力。 However, ibrutinib was consistently more potent than acalabrutinib in all three catalytic activity platforms that measured on -target BTK activity, with IC50 values ranging