第五章 发酵过控制与优化.ppt

本章讲述的内容 5.1 发酵过程技术原理 代谢变化: 就是反映发酵过程中菌体的生长，发酵参数（培养基，培养条件等）和产物形成速率三者间的关系。 目的：了解生产菌种在具有合适的培养基、pH、温度和通气搅拌等环境条件下对基质的利用、细胞的生长以及产物合成的代谢变化，有利于人们对生产的控制。 发酵过程按进行过程有三种方式： 分批发酵(Batch fermentation) 补料分批发酵(Fed-batch fermentation) 连续发酵(Continuous fermentation) 一、分批发酵 1. 分批发酵的定义 是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中，除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外，不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少，微生物得到繁殖。 2. 分批发酵的特点 微生物所处的环境在发酵过程中不断变化，其物理，化学和生物参数都随时间而变化，是一个不稳定的过程。 3. 分批发酵的优缺点 优点 操作简单； 操作引起染菌的概率低。 不会产生菌种老化和变异等问题。 缺点 非生产时间较长、设备利用率低。 4.分批发酵的生长曲线 Pirets fermentation classification （按照产物生成与菌体生长是否同步） 生长关联型 (第一类型） 生长无关联型（第二，三类型） 二、补料分批发酵 1. 定义: 补料分批发酵又称半连续发酵或流加分批发酵，是指在分批发酵过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的发酵方式。 2. 补料分批发酵的优缺点 优点 使发酵系统中维持很低的基质浓度； 不会产生菌种老化和变异等问题。 缺点 存在一定的非生产时间； 和分批发酵比，中途要流加新鲜培养基，增加了染菌的危险。 3.补料分批发酵的类型 补料方式 连续流加 不连续流加 多周期流加 补料成分 单一组分流加 多组分流加 控制方式 反馈控制 无反馈控制 三、连续发酵 1.定义 ：培养基料液连续输入发酵罐，并同时放出含有产品的相同体积发酵液，使发酵罐内料液量维持恒定，微生物在近似恒定状态（恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的pH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率）下生长的发酵方式。 2.连续发酵的优缺点 优点 能维持低基质浓度； 可以提高设备利用率和单位时间的产量； 便于自动控制。 缺点 菌种发生变异的可能性较大； 要求严格的无菌条件。 3.连续发酵的类型 恒化培养：使培养基中限制性基质的浓度保持恒定。 恒浊培养：使培养基中菌体的浓度保持恒定。 4. 连续发酵的代谢曲线 5.2 发酵条件的影响及其控制 生物热：生物热是生产菌在生长繁殖时产生的大量热量。培养基中碳水化合物，脂肪，蛋白质等物质被分解为CO2,NH3时释放出的大量能量。 用途：合成高能化合物， 供微生物生命代谢活动 热能散发 影响生物热的因素：生物热随菌株，培养基，发酵时期的不同而不同。生物热的大小还与菌体的呼吸强度有对应关系。 搅拌热：通风发酵都有大功率搅拌，搅拌的机械运动造成液体之间，液体与设备之间的摩擦而产生的热 。 蒸发热：通入发酵罐的空气，其温度和湿度随季节及控制条件的不同而有所变化。空气进入发酵罐后，就和发酵液广泛接触进行热交换。同时必然会引起水分的蒸发；蒸发所需的热量即为蒸发热。 辐射热：由于发酵罐内外温度差，通过罐体向外辐射的热量。辐射热可通过罐内外的温差求得，一般不超过发酵热的5%。 发酵热的测定 （1）通过测定一定时间内冷却水的流量和冷却水进出口温度，由下式求得这段时间内的发酵热。 （2）通过罐温的自动控制，先使罐温达到恒定，再关闭自控装置测得温度随时间上升的速率S，按下式可求得发酵热： 影响各种酶的反应速率和蛋白质性质 影响发酵液的物理性质 影响生物合成的方向。 例如，四环素发酵中金色链霉菌同时能产生金霉素。在低于30 ℃温度下，该菌种合成金霉素能力较强。当温度提高，合成四环素的比例也提高。在温度达35℃则只产生四环素而金霉素合成几乎停止。 最适发酵温度与菌种，培养基成分，培养条件和菌体生长阶段有关。 最适发酵温度的选择 在发酵的整个周期内仅选一个最适培养温度不一定好。 温度的选择要参考其它发酵条件。 温度的选择还应考虑培养基成分和浓度 发酵罐：夹套（10 M3以下） 盘管（蛇管） （10 M3以上） 二、 pH对发酵的影响及控制 发酵过程中培养液的pH值是微生物在一定环