二细胞器的观察与线粒体的超活染色教案.DOCVIP

PAGE PAGE 3 蚌埠医学院教案 / 学年度 第 学期 教师姓名： 职称： 系（部）：生物科学系 教研室：细胞生物学 授课对象（专业年级）： 授课时间： 年 月 日 课程 名称 中文 医学细胞生物学实验课程 选用 教材 医学细胞生物学实验指南， 蔡绍京主编 授课 时数 3学时 英文 Experiments of Medical Cell Biology 章节 内容 实验二 细胞形态观与细胞器的观察 授课 地点 教学目的 与要求 【实验目的与要求】： 1、掌握超活染色法 2、掌握光镜下线粒体、高尔基复合体的形态和分布 3、了解细胞超微结构特点 教学重点 与难点 【教学重点】： 1、超活染色方法 2、光镜下线粒体、高尔基复合体的形态和分布及其功能 【教学难点】： 1、超活染色方法 2、把握光镜与电镜下细胞器形态的差别 教学方法 讲授、设问、启发、讨论、总结 实验材料 器材：光学显微镜、恒温水浴锅、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、小镊子、吸水纸。 材料：人口腔上皮细胞、蟾蜍肾脏切片、兔脊神经节切片 试剂： 1/5000詹纳斯绿B 教具使用 显微镜、各种标本片、图片、粉笔 教学过程及时间分配 主要教学内容 教学方法 新课导入 讲授新课 5分钟 15分钟 设问：如果细胞是个家庭，那么这个家庭里有哪些成员，他们的分布位置和作用是什么，用什么方法可以观察他们呢？ 实验二 细胞器的观察与线粒体的超活染色 【实验原理】 1、线粒体、高尔基复合体等经过特殊的染色后在光镜下就可被观察到，而有些细胞器由于体积非常微小只有在电镜下才可见到。 2、活体染色原理：詹纳斯绿B?是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态(即有色状态)，呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)。 【实验内容】 蟾蜍肾脏切片线粒体的观察 低倍镜观察肾脏切片总体结构 找到肾小管横切面 换高倍镜观察 观察线粒体、细胞核等形态、分布 区别镜下图和线粒体的超微结构图 二、兔脊神经节切片高尔基体的观察 （一）低倍镜观察神经节切片总体结构 （二）找到神经节细胞 （三）换高倍镜观察 （四）观察高尔基体、细胞核等形态、分布 （五）区别镜下图和高尔基的超微结构图 三、线粒体超活染色与观察 （一）制片 注：将第一次刮取的材料丢弃，留第二次刮取的。为什么？ （二）染色 置于37度水浴锅盖上染色10min。 （三）观察：散在的，伸展的好的细胞。 启发 讲授 设问 讲授并示教学 图片演示 示教 教学过程及时间分配 主要教学内容 教学方法 90分钟 10分钟 （四）结果：染成亮绿色的粒状和短棒状的颗粒，即为线粒体 【实验操作】 观察，并分组实验 【实验报告】 人口腔黏膜上皮细胞线粒体绘图 二、兔脊神经节细胞高尔基体绘图 【讨论】 细胞内的各种细胞器电镜及光镜下的形态有什么区别 作业 【思考题】 1、超活染色的原理及应用。 参考书籍与常用网址 1、章静波，《医学细胞生物学实验指导》， 人民卫生出版社，2007.6 2、翟中和，《细胞生物学》（第三版），高等教育出版社，2007.8 3、生物谷 / 课后小结