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- 2019-03-01 发布于福建
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1.了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式;
2.了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理;
3.学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。;1.原理:
尿素加热至180℃左右,生成双缩脲并放出一分氨。双缩脲
在碱性环境中能与Cu2+结合生成紫红色化合物,此反应称为双缩
脲反应。蛋白质分子中有肽键,其结构与双缩脲相似,也能发生
此反应。可用于蛋白质的定性或定量测定。
反应式如下:;反应式如下:; 双缩脲反应不仅为含有两个以上肽键的物质所有。含有一个肽键和一个—CS—NH2,—CH2—NH2,—CRH—NH2,—CH2—NH2—CHNH2—CH2OH或—CHOHCH2NH2等基团
NH2 NH2
以及乙二酰二胺(O=C——C=O)等物质也有此反应。 NH3也干扰此反应,因为NH3与Cu2+可生成暗蓝色的络离子Cu(NH3)42+。因此,一切蛋白质或二肽以上的多肽都有双缩脲反应,但有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。;2.试剂:;取少量尿素结晶,放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化。熔化的尿素开始硬化时,停止加热,尿素放出氨,形成双缩脲。冷后,加10%氢氧化钠溶液
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