绵羊肉牛不同组织酶化学定位的研究-西北农林科技大学学报.PDF

维普资讯 第 19卷 第 1明 西北农 大学学报 Vo】_I9 No．1 Acta Uaiv．Agric．Boreali— occidentalis M arch 1991 绵羊、肉牛不同组织酶化学定位的研究 丁 伯 起 (西北农业大学兽医系) A．NCWiOn R ．M ．Barlow (甍F专伦敦太 皇家兽篷 院 摘 要 选用屠宰绵羊与 肉牛各 10头的新鲜回物 ．肝 ，肾，肺、脾和淋 巴结作 5种酶 在组织中的位置与活性的比较研究．结果表明：在回肠与肾脏，以碱性与酸性磷酸酶f性最 强，主要分布于腑绒毛上皮细胞与 肾业质近 曲及远 曲小管；在肝脏，酶主要位于实质细胞 内，其中酸性磷酸酶活性 明显；在肺脏，细支气管呼吸上皮IJI非特异性穗酶的活性最强：脾 脏的红、白髓处{j『应为酸性与碱性磷酸酶最强话性部位 在淋巴结．以碱性磷酸酶与琥珀酸 脱氧酶矗为活跃，主要集中于戊质吉f；的淋巴滤泡内． 关键词 酶，f性，组织化学，绵羊，肉牛 中图分类号 $852165，$858．2302165，$858．260．2165 近年来在医学与兽医学领域对酶组织化学研究已日趋普遍 ．酶组织化学技术 已广泛 应用于人类和动物一些疾病的研究，其中包括一氧化碳中毒引起的肝和肾的损伤，脂肪 肝，肝细胞瘤，Nicmannpick病，小鼠肝损伤，太 鼠亚得 里亚霉葡 肾病 ，太 鼠急性 肾 衰，牛白JfIL病 日f起的淋巴结变化与犊牛腹泻日f起的肠粘膜变化” ．然而，酶组织化学 在反刍兽组织中的应用却鲜为研究，仅见报道的有绵羊和肉牛肝脏 中一些水解酶与氧化 酶的分布”l。本文 旨在通过组织化学方法建立酶在绵羊与肉牛中的正常分布．为研究 反刍 不同组织的病理变化提供参考依据． 1 材料和方法 I．1 动物组织的选择 在英国 Bcdford屠宰场任意选 取绵 羊与 肉牛各 l0头的新 鲜组织—— 回肠 肝 ， 肾 肺 脾和淋巴结．它们的胴体与器官经肉品卫生检验均属正常． 1．2 试剂 ‘ 巴比妥钠、氯化钙，硫酸镁，口一甘油磷酸钠、盐酸副蔷薇苯胺，硝酸钠，二甲胂 酸盐、萘酚AS-BI、二 甲替甲酰胺，羟甲基氮基甲烷缓冲液、 醋酸萘醇、亚硝醇 钠、硝基-BT液、琥珀酸钠、吩唪甲硫酸，L一亮氨酸一4一甲氧基 口一萘酰胺、氰化钾， 坚牢蓝盐等．以上试剂均购 自英国SIGMA化学公司． 文稿收到 日期：I99㈣ 卜 ，本研宄在英圃伦教太学皇家兽医学院病理系完成 维普资讯 2 西北农业大学学报 l9卷 1．3 组织样 品的处理 ‘ 将绵羊与 肉牛中的新鲜回肠 、肝、肾、肺、脾和淋巴结切成 3～4ram厚度 ．放人 用液氨冷却的异戊烷 30s．组织块在一70℃低温冰箱内保存，所有被检组织在一18℃低温 切片机 内切成 lOm薄片．将新鲜未固定切片孵育以确定酶的活性． 1．4 酶组织化学方法 (1)碱性磷酸酶 (ALPase)选用磷酸钙法 (pH9．4) 以 口一甘油磷酸钠 (Sodi．m ~-GlyceroDhosphate)为基质 ．37℃下孵育 2h】． (2)酸性磷酸酶 (ACPase)采用经改进的萘酚ASBI磷酸法f6】．本试验用二 甲胂缓 冲液 (pH7．6)．在室温下孵育 lh|61． (3)非特异性酯酶 (NSE)采用 一萘酚醋酸酯 (a-Naphthylacetate)珐．3712F 孵育 10rM~IM． 。 (4)琥珀酸脱 氢酶 (SD