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生物小高考实验总结 一.检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质 1.实验原理： （葡萄糖、果糖、麦芽糖）+斐林试剂———砖红色沉淀（50℃-60℃水浴加热约2 分钟） 脂肪+苏丹Ⅲ染液橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ染液红色 蛋白质+双缩脲试剂紫色 淀粉+碘蓝色 2.实验材料用具与方法步骤、实验结果分析 (1)还原糖的检测 ①材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 ②试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL 的NaOH 溶液，乙液：0.05g/mL 的CuSO4 溶液），现配 现用。 ③步骤：取样液2mL 于试管中→加入刚配的斐林试剂 1mL （斐林试剂甲液和乙液等量混合 均匀后再加入）→水浴加热2min 左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） ★模拟尿糖的检测 1.取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2.检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3.结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖 红色沉淀的是正常人的尿液。 4.分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正 常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。 (2)脂肪的检测 ①材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 ②步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3 滴切片上→2～3min 后吸去染液→滴体积分数50% 的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作装片（滴1～2 滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） (3)蛋白质的检测 ①试剂：双缩脲试剂（A 液：0.1g/mL 的NaOH 溶液，B 液：0.01g/mL 的CuSO4 溶液） ②步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A 液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B 液4 滴，摇 匀→观察颜色变化(紫色) 注意： A 、还原糖鉴定所需材料为苹果或梨匀浆，也可用白色甘蓝叶或白萝卜（原因：还原糖含量 高，颜色为白色或近于无色）不能用西瓜、韭菜、胡萝卜，也不能用甘蔗。 B 、斐林试剂由甲液（0.1g/ml 的NaOH 溶液）乙液（0.05g/ml 的CuSO 溶液）使用时，甲 4 乙等量混合均匀后再注入（现配现用），需水浴加热，故要用到酒精灯、三脚架、石棉网灯。 C、脂肪的鉴定，制作子叶临时切片用显微镜观察，故要用到显微镜、载玻片、盖玻片，还 1 需用 50%的酒精，作用是洗去浮色，因为苏丹Ⅲ （Ⅳ）溶于酒精。观察时，先低倍镜后高 倍镜（在低倍镜下找到花生子叶最薄处，移到视野的中央，再转动转换器，换上高倍镜，调 光圈，使视野变亮，调细准焦螺旋使清晰） D 、双缩脲试剂由A 液（0.1g/mlNaOH 溶液）和B 液（0.01g/mlCuSO4 溶液）组成，使用时 先注入A 液1ml,摇匀后再注入4 滴B 液摇匀。注意B 液不能过量，而且不需加热。 考点提示： （1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原性糖。 （2 )还原性糖植物组织取材条件？ 含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。 （3)研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 加石英砂是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜 色变化不明显。 （4 ）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 （5)还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为： 浅蓝色 棕色 砖红色 （6 ）花生种子切片为何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。 （7 ）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般 是什么？ 切片的厚薄不均匀。 （8 ）脂肪鉴定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9 ）双缩脲试剂A 、B 两液是否混合后用？先加A 液的目的。怎样通过对比看颜色变化？ 不能混合；先加A 液的目的是