哺乳动物基因工程xin.ppt

反转录病毒具有强启动子，克隆此类载体上的外源基因有可能得到有效的表达。 反转录病毒不但感染效率高，而且通常还不会招致寄主细胞的死亡，被它感染的或转化的动物细胞能够持续许多世代，保持正常生长和形成感染性病毒颗粒的能力。 反转录病毒的一般生物学特性 反转录病毒载体的主要类型 辅助病毒互补的反转录病毒质粒载体 此种带外源选择标记基因的重组病毒基因组有缺陷，不能合成自身蛋白质，故包装所需的全部蛋白质需靠辅助病毒提供。 不需要辅助病毒互补的反转录病毒质粒载体 当用缺陷性的重组的反转录病毒质粒载体，例如pMLV-gpt DNA传染ψ2包装细胞株时，它便会整合到寄主染色体DNA上进行转录，合成出具有psi序列的反转录病毒载体RNA。 三、工程胚胎干细胞法 胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES)是指从哺乳动物胚胎囊胚期内的细胞团中分离出来的尚未分化的胚胎细胞，这种细胞具有发育的多能性，能够分化出各种组织。 胚胎干细胞介导法：是将外源基因直接导人ES细胞，经体外培养筛选后再注入到受体囊胚腔中，与其中的囊胚细胞聚集在一起，成为受体胚胎的一部分，参与其分化。由这种胚胎发育而成嵌合体的转基因动物，即其中有一部分组织来源于整合有外源基因的供体ES细胞。在嵌合过程中，被转化的ES细胞分化而成的生殖细胞可通过杂交将引人的外源基因传递下去。 第四节 利用哺乳动物工程细胞生产重组蛋白 哺乳