《细胞核与下染色质》.pptVIP

细胞核与染色质 王飞 fei@jlu.edu.cn Introduction- Nucleus 最大的细胞器(organelle) Cell biology concern about… 细胞生物学： 基本结构 组成成分 核内生命活动的组织、协调 生理意义 基因的分子生物学： 染色质包装 从DNA到mRNA 非编码RNA 遗传学 生物化学 内容提要 细胞核基本结构 核被膜 核基质 染色质 核仁 核体 核被膜的结构组成 核被膜 (nuclear envelope) 核膜(nuclear membrane) 外核膜 核糖体颗粒 与内质网相连 内核膜 无核糖体颗粒 LBR 核周间隙 与内质网腔相通 核孔 内外膜融合 孔膜区 核孔复合体(NPC) 孔膜区域组装的复杂蛋白复合物 核质物质运输 核纤层(nuclear lamina) 核纤层蛋白(lamin A-C) 纤维状网络结构 结构支撑 调节基因表达 调节DNA损伤修复 核基质 核骨架 蛋白质纤维网架结构体系 真核生物细胞核起源于原核细胞入侵？融合？ 染色质 分子生物学：万倍压缩 核仁与核体 核仁：染色体的核仁组织区 RNA 蛋白 核糖体的装配工厂 内容提要 核内分子生物学过程 染色质结构调节 DNA复制、修复、重组 基因转录及其调控 RNA 加工 短片：chromosome coil 短片：DNA replication 短片：strand exchange 短片：gene transcription 内容提要 核孔复合体-核质转运通道 跨内外核膜 亲水通道 核孔直径 80-120nm 复合体直径120-150nm 自由扩散 顺浓度梯度 有效直径 9-10nm 40-60KD 无需能量 主动运输 信号肽 需能量 不去折叠 双向同时运输 转运速度极快（~500个/s） 短片：Rapid nuclear importation 核孔复合体的结构 30余种蛋白亚基 多拷贝组合 八边形对称结构 核孔复合体转运的分子尺寸限制 无定形结构域(unstructured region) 无序屏障 主动运输与信号肽 蛋白分选：信号肽 核转运信号(NTS) 核分选：核定位信号(NLS) 核输出信号(NES) 任何位置 完成分选后不剪切 核孔复合体转运的生物大分子 NTS/向导蛋白 转入(Import) 组蛋白 DNA聚合酶 RNA聚合酶 RNA加工相关蛋白 转出(Export) tRNA mRNA 核糖体前体颗粒 转入转出 基因转录调控蛋白（转录因子） RNA向导蛋白 主动运输模型 通道：NPC 出入口：蛋白纤维 搬运工：核转运受体 (nuclear transport receptor) 辅助：FG-repeats Ran GTP 核转运受体对靶蛋白的识别 直接结合 多种NTR 识别不同NTS 间接结合 适配蛋白(adaptor protein) GTPase：Ran 导航： 控制转运方向 调控因子： Ran-GAP Ran-GEF Ran控制的NTR分子开关 NPC主动运输的分子模型 RNA的出核转运 向导分子：具有NES的辅助蛋白 质量检查：正确折叠和加工的RNA分子才能 获得出核资格 内容提要 核膜的崩解与组装-骨架章交叉 发生于细胞分裂过程中 触发点：磷酸化 p34cdc2 N端Ser22 C端Ser392 Lamin A 单体形式游离 Lamin B 与核膜小泡结合 核膜的崩解与组装 找到染色体 前期核膜崩解后 游离于胞质内： 核膜小泡(双层核膜+膜蛋白) NPC亚基蛋白+NIR FG repeats Lamin Ran Ran-GAP 末期染色体上： Ran-GEF → Ran-GTP Cloud Lamin去磷酸化启动核膜重组： 核膜小泡→ Lamin ← NPC蛋白+NIR NPC+NIR → Ran-GTP Cloud 核蛋白回归及非核蛋白屏蔽 NPC 组装完毕即开始工作：入核转运 NLS不剪切的生理意义：反复利用 核膜组装紧贴染色体：屏蔽非核蛋白 内容提要 核仁- Ribosome-producing factory Unlike many of the major organelles in the