《医学遗传与胚胎发育》5.基因字表达调控 整合课程.pptVIP

原核生物在翻译水平的调节 作用于翻译的起始和终止环节 调节蛋白 反义RNA 第二节 真核生物基因表达的调控 　　　　真核基因组的结构特点 结构庞大（1%编码）； 转录产物为单顺反子 含有大量的重复序列 具有不连续性（非编码序列和间隔区） 1 含有多种RNA聚合酶； RNAPol I (rRNA)、PolIII(tRNA) 2 转录的激活与被转录区域的染色质结构变化有关； 3 正调控为主； 4 转录与翻译在不同的区域进行（不偶联）； 5 转录后修饰与加工更为复杂 真核基因表达的调控特点 一、具有转录活性的染色质结构的变化—便于RNA聚合酶及转录因子附着 对核酸酶敏感 活化基因常有高敏位点， 位于调节蛋白结合位点附近 DNA拓扑结构变化 天然双链DNA均以负性超螺旋存在 基因活化后:负超螺旋 RNAP 正超螺旋 DNA碱基的甲基化 修饰变化 真核DNA约有5%的胞嘧啶被甲基化 甲基化范围与基因表达程度呈反比 组蛋白变化 富含Lys组蛋白水平降低 H2A·H2B二聚体不稳定性增加 组蛋白H3、H4发生乙酰化、甲基化或 磷酸化修饰 * 对核酸酶敏感 高敏位点 具有转录活性的染色质区域 对DNaseⅠ核酸酶降解特别的位点 在启动子/增强子等调控区 结合各种调节因子 没有核小体结构 甲基化程度低 高敏位点 * DNA碱基的甲基化 甲基化的碱基 C 5-mC A 6-mA 甲基化范围与基因 表达程度呈反比 异染色质的DNA凝集状态高 DNA甲基化程度高 缺乏转录活性 常染色质的DNA凝集状态低 DNA甲基化程度低 具有转录活性 真核生物通过形成异染色质关闭某些 基因的表达 CpG岛 长度1～2Kb，密度高，G/C含量～60% CpG非甲基化 存在高敏位点（启动子） 抑癌基因CpG岛甲基化—肿瘤发生 DNA碱基的甲基化修饰变化 * 组蛋白变化 染色质重塑 染色质中与转录活性相关的结构变化 组蛋白密码 H3/H4被乙酰化---染色质有转录活性 基因开始转录 H4/H4去乙酰化---基因停止转录 染色质无转录活性 组蛋白密码--乙酰化/去乙酰化的H3/H4 染色质活化状态的标志 特异的蛋白质识别/结合组蛋白密码 调节特定的基因表达 二、参与基因调控的顺式作用元件和反式作用因子 1 顺式作用元件 和被转录的结构基因在距离上比较接近的DNA序列 1. 启动子和启动子上游近侧序列 TATA box CAAT box GC box CpG岛 （MeCP1、 MeCP2） 2. 增强子（enhancer） 概念： 特点：不受与启动子距离、序列及方向的制约； 有组织特异性 。 3.反应元件 概念： 特点：协同作用。 4. 沉默子（Silencer） 概念： 特点：负性调节元件。 2 反式作用因子 两个必需结构域： 与顺式元件结合的结构域 与反式元件或RNA聚合酶结合的激活结构域 3 反式作用因子的结构模式 （1） α螺旋—β转角—α螺旋 （helix- turn- helix） 其中一个为识别螺旋，含有较多能与DNA相互作用的AA残基 (2) 锌指 （zinc finger） 约30氨基酸残基，4个氨基酸残基（两个cys,两个 his, 或4个cys)以配位键与Zn2+相互作用 （3）亮氨酸拉链 （leucine zippers） 一段肽链中每隔7个氨基酸即有一个亮氨酸，该肽段所形成的螺旋可出现疏水及亲水二个面，疏水面即亮氨酸拉链。 （4）螺旋—环—螺旋（helix-loop-helix） RNA pol II 转录终止的调节机制 ?? 反式作用因子的作用特点和规律 １.一种反式因子能与多种顺式作用元件结合 ２.一种顺式作用元件能与多种反式因子结合 ３.多以异二聚体形式与顺式作用元件结合 ４.化学修饰可调节其活性 ５.反式因子相互作用发挥功能 基因翻译水平及翻译后阶段的调控 对翻译起始因子的磷酸化修饰决定了其活性； RNA结合蛋白参与了对翻译起始的调节； 对翻译产物水平及活性的调节可以快速调控基因表达； 小分子RNA对基因表达的调节： 微小RNA（miRNA)、小干扰RNA（siRNA）、piRNA etc. 基因表达在原核与真核生物中区别 与染色质