2第二章培养基及其制备.pptVIP

三、发酵培养基的选择 一）、配置培养基的原则 1、根据不同微生物的营养需要配置不同的培养基 2、注意各营养物质的浓度和配比 3、调节适宜的物理化学条件 4、根据培养微生物的目的配置 5、尽量使用廉价易得的原料 1、生态模拟 2、查阅文献 3、借助优选法或正交试验法精心设计培养基配方 4、实验比较 实验的规模一般由定性到定量，由小到大。 发酵培养基的用途与要求、成分、配比经实验确定，配制时兼顾原料来源、成本及工艺管理； 培养基配方举例 牛肉膏蛋白胨培养基(常用的细菌培养基) 牛肉膏5克、 蛋白胨10克 、NaCl5克 、水1000毫升、 pH7.2～7.4 (琼脂15～20克) 高氏一号培养基(常用的放线菌培养基) 可溶性淀粉20克、 KNO31克 K2HPO4 0.5克、 MgSO4 0.5克 、NaCl 0.5克、 FeSO4 0.01克、水1000毫升、pH7.4～7.6、琼脂15～20克 察氏培养基(培养霉菌用) 蔗糖 20克、 NaNO3 3克、 K2HPO4 1克 、KCl 1克、 MgSO4 0.5克、 FeSO4 0.01克、 琼脂20克、 水1000毫升、自然pH 无氮培养基(培养自生固氮菌用) 葡萄糖 10克 、NaCl 0.2克、 KH2PO4 0.2克 、CaSO4·2H2O 0.1克、 MgSO4 0.2克、 CaCO3 5克、 琼脂 20克、水1000毫升、自然pH 伊红-美蓝培养基(检查肠道细菌用) 蛋白胨 10克、 K2HPO4 2克、乳糖10克、琼脂25克，水1000毫升，pH7.6 2％伊红水溶液2毫升、0.5％美蓝水溶液2毫升、将乳糖、伊红、美蓝分别灭菌后，加入灭菌的培养基中摇匀，倒平板。 第二节 淀粉水解糖的制备 糖化(Saccharify)：在工业生产上将淀粉水解为葡萄糖的过程，得到的水解糖液叫淀粉糖。 糖化的原料：薯类淀粉、玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉等。 水解糖液的质量直接关系到生产菌的生长速度与代谢产物的积累，其中的低聚糖类与复合糖类等杂质越低越好。 一、淀粉的水解的理论基础 1,淀粉的颗粒的外观 淀粉颗粒呈白色，不溶于冷水和有机溶剂，其内部呈复杂的结晶组织。随原料品种和种类的不同，淀粉颗粒具有不同的形状和大小。形状不规则，大致上可分为圆形、椭圆形和多角形。 淀粉颗粒的构成如下： 氢键 聚集 淀粉分子链 ───→ 针状晶体 ───→ 淀粉颗粒 2，淀粉的分子结构 淀粉可分为直链和支链淀粉两类。 直链淀粉通过α-1，4键连接 。 支链淀粉的直链部分通过α-1，4键连接，分支点则有α-1，6键连接，支链平均有25个葡萄糖基团。 酸解法 反应原理：淀粉——————葡萄糖 优点：设备要求简单，水解时间短（20min），设备生产能力大 缺点：高温高压下进行，设备要求耐腐蚀、耐高温、耐高压；副反应多，淀粉转化率低；对原料要求严格，淀粉颗粒颗粒大小均匀、不宜过大，淀粉乳浓度不能过高。 淀粉水解糖的制备 几种水解方法的比较 从时间上看：酸解法最快，酶解法最慢 从原料转化率和糖液质量上看：酶解法酸酶法酶酸法酸解法 ㈠淀粉的水解反应 影响复合反应的因素： 1、淀粉浓度的影响（用DE值表示葡萄糖纯度）： DE值＝还原糖/干物质×100％ 2.、酸的影响：种类及浓度 （三）葡萄糖的分解反应及其影响因素 葡萄糖 5’-羟甲基糠醛 乙酰丙酸、蚁酸、有色素物质； 葡萄糖的理论收率： 实际收率 淀粉转化率： 葡萄糖值—DE值 液化液或糖化液中的还原糖含量(所测得的糖以葡萄糖计)占干物质的百分率。 DX值： 糖化液中葡萄糖含量占干物质的百分率。 水解糖液的质量要求和控制要点 色泽：呈强黄色透明液 还原糖含量，18％(酸法);25-38%(酶法) DE值：﹥90％ (酸法); ﹥ 95 %(酶法) 透光率： ﹥ 40% (酸法); ﹥ 60 %(酶法) （420nm） pH值：4.6~4.8 淀粉转化率：92%以上（实际产量/理论产量） 1、加酸通风沉淀法（冷酸通风处理法）：糖蜜加水稀释到500Bx 加入0.2～0.3％浓硫酸，通入压缩空气1h 静置澄清8h，取上清液。 2、加热加酸沉淀法（热酸通风沉淀法）： 糖蜜加水稀释到40％ 加适量硫酸调节pH值到4～4.5 放入澄清槽加热至80～90℃，通风30min 70～80℃保温 8～12 小时，取上清液。 效果比方法1好，但是费时费设备 3、添