Sebia全自动凝胶电泳仪的临床应用.pptVIP

肿瘤细胞刺激机体免疫系统产生免疫应答，也可以说明肿瘤患者免疫功能低下主要是对细胞免疫功能而言，体液免疫功能下降不显著 * 新生儿由于结合珠蛋白合成功能不完全，当有炎症病灶时，α2区带无明显增高，而α1区带可明显增高。 * 本病是极少见的先天性疾病，可能由于肝细胞内白蛋白合成功能遗传性缺陷或明显低下所致，球蛋白代偿性增加从而对维持血浆胶体渗透压有一定作用。 * 双白蛋白血症分为持久型和暂时型两种。持久型主要是一种家族性血清蛋白异常的疾病，极少见，为常染色体不完全显性遗传；而暂时型主要是指肾功能不全的患者在治疗期间使用大剂量的β-内酰胺类抗生素，可形成快泳动性的白蛋白成分，治疗中断即逐渐消失。 ? * 低血浆AAT可以发现于胎儿呼吸窘迫综合征，AAT先天性缺陷易导致肺气肿和肝硬化。由于α1抗胰蛋白酶合成低下致使血中或组织中的胰蛋白酶活性相对增加，肺结缔组织破坏亢进，对青年可以发生肺气肿，当合并感染时，可见白蛋白减低，但由于α1抗胰蛋白酶减少，即使有炎性病灶，α1区带也不增加 * Myeloma 骨髓瘤； Macroglobulinemia 巨球蛋白血症： Malignant lymphoma，恶性淋巴瘤：Monoclonal单克隆 Gammapathies * 病人情况：以发烧38.5度入院 TP：70.7 ALB:37.8 TG:0.75 TC:2.23 BUN:20.0 CRE:1297 UA:1014 P:2.65 Ca:1.81 IgG:2.97 IgA:0.23 IgM:0.17 C3:0.49 C4:0.24 CRP:13.7 ESR:116 尿蛋白3＋ 诊断：多发性骨髓瘤 * * 此处所谓的寡克隆带是指存在寡克隆丙种蛋白血症，存在多条一种或多种类型重链和一种或两种类型轻链。一般在移植后（免疫抑制剂）和艾滋病时出现，病人的免疫系统分泌的球蛋白有缺陷，没有正常的结构和功能。 * * * 移植病人之寡克隆带 艾滋病人之寡克隆带 游离λ轻链 Electrophoretic exploration of proteinuria 非浓缩尿蛋白电泳临床应用 肾单位生理及与血浆蛋白质关系 　　肾脏近二百万个肾单位每天过滤1600 升血液并产生180升原尿，经肾小管重吸收后最终排出约1.5升终尿。 白蛋白 转铁蛋白 免疫球蛋白 微蛋白 白蛋白 转铁蛋白 免疫球蛋白 微蛋白 肾小球滤过膜 肾小管重吸收 微蛋白 肾小管分泌(Thamm-Horsfall蛋白) 终尿中白蛋白占1/3 ， 球蛋白占 2/3。 尿蛋白定义 生理性尿蛋白为50 — 150 毫克／天 (大约 100毫克／升以下) 主要成分为白蛋白 (30毫克／天 以下) 病理性尿蛋白为超过1８0 毫克／天 蛋白质成分复杂多样 尿蛋白增加的原因 生理性：间歇性 (体位, 高蛋白饮食, 剧烈运动后, 精神压力大) 肾前性：高血压，高热，心脏或肝脏衰竭,…  血中蛋白浓度过高 (溢出性蛋白尿) 肾性：肾小球或肾小管损害 (或两着均有) 肾后性：泌尿生殖道损害 十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶电泳（SDS-AGE）技术的分析原理 SDS（Sodium Dodecysulphate）是一种阴离子型表面活性剂，当其浓度达蛋白质的5-10倍时，与还原剂共同作用，能使蛋白质分子内的氢建和二硫键断裂，解离成单独的亚基与SDS充分结合形成带负电荷的亚基-SDS胶束，所带电荷量远远超过了蛋白质分子原有的电荷量，从而消除了不同分子之间的原有电荷差异。根据流体动力学的研究证明，这种复合物是椭圆形，短轴约为1.8A，但长轴的长度与亚基分子量的大小呈正比，加之琼脂胶的分子筛作用，使电泳的迁移率与摩擦系数的反比关系只表现在蛋白质分子量大小上，因此尿蛋白各组分便可按分子量的大小顺序排列在琼脂糖凝胶上。 70 kDa 70 kDa 肾单位生理结构 肾小球滤过膜 肾小管重吸收 SDS-agarose gel electrophoresis 十二烷基磺酸钠 SDS SDS + - 尿蛋白电泳以分子量排列原理 SDS SDS + - 分子量标记 (kDa) 14.4 30 43 67 94 低分子量 ( 70 kDa) 高分子量( 70 kDa) 白蛋白 Hydragel 尿蛋白电泳结果解释 分子量标记(kDa) 14.4 30 43 67 94 白蛋白 肾小管标记 肾小球标记 Hydragel 尿蛋白电泳 14 400 20 000 30 000 43 000 67 000 94 000 130 000 溶菌酶 视黄醇结合蛋白 轻链 白蛋白 转铁蛋白 免疫球蛋白 ?2-微球蛋白 ???微球蛋白 Ser Ser PM Ser Ser 肾小球滤过功能 低分子量蛋