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G6PD缺乏症与NADPH代谢的研究 贺铭1, 3江俊2梁蕾蕾3蒋玮莹1(通讯作者) 1中山大学中山医学院医学遗传学教研室 广东广州510089； 2德宏职业学院云南芒市678400； 3昆明医科大学基础医学实验教学中心云南昆明650500 【摘 要】葡萄糖?6■磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase, G6PD) 缺乏症是世界上最为常见的酶缺乏症之一。G6PD催化磷酸戊糖途径的第一步， 由此酶催化牛成的还原型辅酶II (NADPH)参与抗氧化性损伤是极其重要的。为 了更好地理解该病，木文对G6PD表达、细胞内定位、组织表达和翻译后调节所 起到的重要作用进行总结。 【关键词】G6PD缺乏症；还原型辅酶II (NADPH)；活性氧簇(ROS)；谷胱 甘肽；过氧化物酶；超氧化物歧化酶(SOD) 葡萄糖?6■磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症俗称蚕豆病，是一种世界上最为常见 的遗传性溶血性红细胞酶缺乏病。该病在全世界分布广泛，全球约有4亿多人受 累［1］。其发病原因主要因G6PD基因突变，导致G6PD酶活性降低，红细胞受氧 化损伤而遭到破坏，引起溶血性贫血。世界卫牛组织根据G6PD酶活性水平和临 床症状，把G6PD变异性分成5类：I型：酶活性为0,伴有慢性非球形细胞性溶 血性贫血；II型：酶活性严重缺乏(10%),当食用蚕豆或某些药物时发牛溶血 性贫血；III型：酶活性轻中度缺乏(10%?60%),常因感染或药物诱发溶血，一 般没有溶血性贫血；IV型：酶活性为60%-150%,没有溶血性贫血，IV型乂分为 a和b两种(a：酶活性60%-100%； b： 100%-150%)； V型:酶活性高于正常( 200%),没有溶血性贫血［2］。 牛物化学与分子牛物学研究 当葡萄糖转运至细胞后，在己糖激酶/葡萄糖激酶作用下使葡萄糖磷酸化。 葡萄糖?6■磷酸(G6P)可在糖酵解途径中被利用，产牛能量ATP和NADH,以糖 原形式存储或在磷酸戊糖途径(PPP)中被利用。磷酸戊糖途径被分为氧化阶段 (催化第一步脱氢反应的G6PD是此代谢途径的关键酶)和非氧化阶段(包括转 酮醇酶和转醛醇酶作用下一系列基团转移)，磷酸戊糖途径的主要产物包括5■磷 酸核糖和NADPH：前者参与核酸合成，后者在G6PD和6■磷酸葡萄糖酸脱氢酶 (PGD)作用下由NADP+接受产生的H+而生成。G6PD是体内磷酸戊糖途径产生 还原型辅酶II (NADPH)的关键酶，NADPH作为辅酶参与维持体内重要的抗氧化 物，还原型谷胱甘肽(GSH),因此G6PD对维持红细胞抗氧化系统功能正常及保 证红细胞膜骨架的稳定性有着极其重要的作用。 G6PD缺乏症以X染色体连锁不完全显性方式遗传oG6PD基因定位于Xq28, 即X染色体长臂2区8带，这一序列在进化中高度保守。一个含赖氨酸残基的八 肽序列(RIDHYLGK)决定G6PD酶活性，提供二核昔酸结合位点的七肽序列 (GxxGDLx)高度保守［3］。基因由13个外显子和12个内含子组成，在哺乳动物 细胞中，表达的蛋白质以二聚体或四聚体呈现活性，而非单体。其蛋白质由514 个氨基酸组成，具有NADP和G6P的结合位点和稳定二聚体、保持蛋白质处于活 性构象而提供给NADP的变构调节结合位点［3］。人类G6PD变异体的功能分析表 明［4］, G6PD电荷特征、极性、基团的pK值、替代氨基酸的支链基团对酶活性 产生影响；在锚定NADP+至催化结构域、维持酶活性吋，G6PD氨基酸链中459 和463位精氨酸发挥了重要作用；竣基末端第459位密码子对G6PD酶活性有重 要作用。 G6PD的调节 有观点认为，NADPH/NADP比值调节G6PD活性，当比值下降导致G6PD酶 活性增加，以产生更多的NADPH。事实上，G6PD的激活是由于细胞暴露于多种 胞外氧化物质而引起NADPH水平降低。体外实验已经很清晰地证明NADPH/NADP 比值调节G6PD活性，但在体实验并没有做到。其它因素如非氧化性刺激物也可 以调节G6PD活性。许多研究显示G6PD活性受转录水平、翻译水平、翻译后水 平和细胞间定位的高度调节，这其中主要是通过诸如磷酸化和直接的蛋白质?蛋 H质相互结合的方式对G6PD的翻译后进行调节，如1, Ataxia Telangiectasia Mutated (ATM)蛋白质和p53[5, 6]。首先证明的是：G6PD经过翻译后修饰(磷 酸化)和生长因子如PDGF和EGF,在哺乳类细胞(纤维母细胞和肾皮质细胞) 刺激G6PD活性和细胞间移位。类似的发现还有：Phosphatidylinositol-3-kinase (PI-3K), Phospholipase C-gamma;和 Ras-GTPases 调节生长因