山西医科大学核医学分子影像综合服务平台.doc

山西医科大学 教 案 （理论教学用） 单位 ： 山西医科大学第一医院 教研室 ： 影像医学与核医学 任课教师姓名 ： 课程名称 ： 核医学 授课时间 ： 山西医科大学 教 案 （实践教学用） 单位 ： 山西医科大学第一医院 教研室 ： 影像医学与核医学 任课教师姓名 ： 课程名称 ： 核医学 授课时间 ： 授课章节 第六章 体外分析技术 授课对象 本科生 授课时数 授课时间 年 月 日 授课地点 教学目的 1、理解放射免疫分析的基本原理 2、理解非放射性标记免疫分析技术 3、了解常用的分析技术 重点难点 放射免疫分析的基本原理和应用 教学方法 多媒体 教学仪器 授课提纲 放射免疫分析 免疫放射分析 非放射免疫分析 体外分析技术的发展和现状 选用教材 《核医学》第八版 李少林主编 参考教材 供8年制及7年制临床医学等专业用《核医学》，张永学主编，人民卫生出版社出版 《简明核医学》（第二版），潘中允主编，北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社出版 授课章节 第六章 体外分析技术 授课对象 授课时数 授课时间 授课地点 教学目的 1、理解放射免疫分析的基本原理 2、理解非放射性标记免疫分析技术 3、了解常用的分析技术 重点难点 放射免疫分析的基本原理和应用 教学方法 多媒体 教学仪器 教学步骤 放射免疫分析 基本原理 基本试剂 质量控制 免疫放射分析 基本原理 实验方法 非放射免疫分析 酶标记免疫分析 化学发光免疫分析技术 时间分辨荧光免疫分析 胶体金标记分析技术 第四节 体外分析技术的发展和现状 思考题 放射免疫分析的基本原理是什么？其与免疫放射分析的主要区别点有哪些？ 放射免疫分析的基本试剂包括哪些？要求分别是什么？ 常见的非放射免疫分析方法有哪些？ 参考教材 供8年制及7年制临床医学等专业用《核医学》，张永学主编，人民卫生出版社出版 《简明核医学》（第二版），潘中允主编，北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社出版 讲授内容 注解 第六章 体外分析技术 体外放射配体结合分析---指在体外条件下，以放射性核素标记的配体为示踪剂，以结合反应为基础，以放射性测量为定量手段，对微量活性物质进行定量分析的一类检测技术的总称。 第一节 放射免疫分析※ 一、定义：是利用标记抗原和非标记抗原竞争结合其特异抗体，给予充分的时间，使反应达到平衡，然后分离并分别测定结合的抗原抗体复合物放射性（B）和游离抗原放射性（F）来计算非标记抗原含量的一种超微量分析技术。 二、基本原理： 最具代表性的一类检测技术，是建立在抗原抗体结合的高度特异性和放射性测量的高度灵敏性的基础上的。 Ag ＋ Ab AgAb ＋ *Ag *AgAb 动态平衡体系中，*Ag与Ag具有同样的免疫活性和结合反应能力，当*Ag和Ab的量恒定，且Ag+ *Ag的分子数〉抗体的分子数 ，*Ag与Ag相互竞争同Ab结合，彼此抑制，待测Ag与*AgAb呈负相关函数关系。 50 50 100 0 5 10 15 0 B/B0% 图示：剂量-标准抗原浓度 三、基本试剂 （一）抗体 RIA使用：多克隆抗体和单克隆抗体 衡量抗体质量的指标是：亲和力、特异性和滴度 （二）标记抗原*Ag的质量要求： 标记后不改变原有抗原的生物活性； 标记的放射性核素的t1/2不能太短； 比活度和放化纯度足够高，保证分析的灵敏度。 （三）标准品（标准抗原） 是已知含量并呈梯度浓度的系列标准抗原，作标准曲线用。 要求：保证与被测物具有相同的免疫活性和介质。 （四）分离方法 1.双抗体法 2.沉淀法 3.双抗体法+沉淀法 4.吸附分离法 5.固相分离法 （五）、放射性测量仪器 如用125I做标记，常用γ井型计数器对γ射线进行测量。如用3H或14C做标记用液体闪烁计数器（liquid scintillation detector）对β射线进行测量。配以计算机系统对被测样品自动测量，数据处理和打印结果。 四、质量控制 （一）、目的： 保证分析误差控制在可接受的范围内 （二）、分类： 实验室内部质控和实验室间质控 （三）、误差的来源： 1、系统误差：表现为结果呈倾向性偏高或偏低。常见因素①方法误差：如标准品稀释不正确，分离效果不好等②仪器和试剂：仪器状态、量器、试剂纯度等③操作误差：操作习惯、加错样品等。通过努力系统误差可以消除。 2、随机误差：表现为某一管或某一部分样本的结果误差随机的、偶然的，小误差的概率大。常由操作者操作不当造成。 （四）、质量控制的指标 1、稳定性：指RIA实验批间的重复性。 常用指标有： 零标准管结合率（B0%）：一般要求在30-50