课件：药物色谱分析.pptVIP

第三节 非极性键合相色谱法（non-polar bonded phase chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则 （一）中性化合物的分析 2、改变有机溶剂的类型 一般改变有机溶剂不会影响样品的出峰顺序，但也有特例如图： 第三节 非极性键合相色谱法（non-polar bonded phase chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则 （一）中性化合物的分析 3、使用混合有机溶剂：在二元系统不能分离时采用如图 第三节 非极性键合相色谱法（non-polar bonded phase chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则 （一）中性化合物的分析 3、使用混合有机溶剂采用下图方法设计实验分离样品 例：取代萘的溶剂选择性实验，如图 第三节 非极性键合相色谱法（non-polar bonded phase chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则 （二）酸性化合物和碱性化合物的分析： 与中性化合物分析相似，区别是加入pH值调节剂和缓冲盐。 pH值的选择：目的是调节流动相的pH值或利用同离子效 应，抑制样品组分的解离，增加其在固定相中的溶解度， 达到分离有机弱酸弱碱的目的，称为离子抑制色谱（ISC） 适于分析的3.0≤pKa≤7.0弱酸， 7.0≤pKb≤8.0弱碱或两性化合物 流动相对反相保留的影响与样品类型（酸、碱、中性）的关系，如图 表 酸性、碱性官能团的pKa值 取代基 pKa 酸性 碱性 酯基取代 芳环取代 酯基取代 芳环取代 磺酸,-SO3H 1 1 氨基酸 2~4 9~12 羧酸-COOH 4~5 4~5 硫醇,-SH 10~11 6~7 嘌呤 2~4 9 酚,-OH 10~12 吡嗪 1 亚砜,-SO 1~2 噻唑 1~3 胺，吡啶 8~11 5 咪唑 7 哌嗪 10 第三节 非极性键合相色谱法（non-polar bonded phase chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则 （二）酸性化合物和碱性化合物的分析： 缓冲盐的选择：目的是维持组分在色谱柱的内的平 衡，得到较好的重现性。要求： 应具有适当的缓冲容量 缓冲溶液浓度应适当，一般为10~50mmol/L 与色谱系统相匹配，注意缓冲剂的截止波长 缓冲液的挥发性，应尽量选择挥发性缓冲盐 第三节 非极性键合相色谱法（non-polar bonded phase chromatography） 四、非极性键合相色谱法的流动相的设计原则 （二）酸性化合物和碱性化合物的分析： 胺类添加剂：在分析碱性化合物时抑制拖尾现象 建立 酸性 和碱 性样 品分 析方 法的 步骤 图示 分析酸性和碱性药物时的常见问题及方法 分析碱性药物时会遇见的常见问题及解决方法 常见问题 原因 解决方法 色谱峰拖尾或不出峰 亲醇基效应所致 流动相中加入小分子有机胺 使用离子对技术 添加缓冲液 色谱峰裂分或多重峰 进样后游离药物与质子化的药物在流动相中重新平衡所致 流动相溶样后再进样 调整进样溶液的pH值 分析酸性和碱性药物时的常见问题及方法 分析酸性药物时会遇见的常见问题及解决方法 常见问题 原因 解决方法 色谱峰拖尾或不出峰 待测物质离子化所致 调整流动相pH值至酸性 加入酸性缓冲液进行离子抑制 色谱峰裂分或多重峰 二次化学平衡所致 流动相溶样后再进样 调整进样溶液的pH值 第四节 极性键合相色谱法（polar bonded phase chromatography） 极性键合色谱法的特性 优点 缺点 使用非水流动相时，色谱柱稳定 可改变流动相或色谱柱来改变分离选择性 特别适用于在水溶液中易降解的化合物 溶剂黏度低，柱压低 有机谷物多溶于正相色谱的溶剂，适于制备液相 离子型样品适于非极性色谱 不易控制溶剂强度 有时柱效较非极性色谱低 低沸点溶剂易挥发或产生气泡 吸附水使样品保留不稳定，有时不能采用梯度洗脱 有机溶剂的处理成本高 第四节 极性键合相色谱法（polar bonded phase chromatography） 极性键合色谱相表面的基团组成：键型、主体基团和 极性端基，如图 第五节 离子交换键合相色谱法（ion exchange chromatography,IEC） 以离子交换剂为固定相,以缓冲液为流动相,借助试样中电离组分对离子交换剂亲和力的不同而达到分离离子型或可离子化的化合物的目的的方法 谢谢各位！ 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖