分子生物学5.2.6基因组文库的构建.pptVIP

5.2.6 基因组文库的构建 基因文库(gene library) 基因组文库(genomic library) cDNA文库(cDNA library) 1.起因：绝大多数基因难以直接分离得到 高等真核生物，基因组DNA十分庞大 基因可达数万个 基因组成结构复杂 编码序列 非编码序列 调控序列 间隔序列 重复序列 单个目的基因在整个基因组中所占比例极小 未知基因更难克隆 要分离的目的基因往往是未知基因 无法对它进行特异性扩增， 只能对所有的基因进行扩增， 构建基因文库 然后再根据不同的方法将所需的克隆筛选出来 最后分离得到目的基因。 2. 克隆未知基因常用建库的方法 目的基因： 已知基因： 未知基因：构建基因文库 特定探针的制备 文库的筛选（筛库） 含目的基因的克隆 3.基因文库概念 又称DNA文库，是指某个生物的所有基因组DNA克隆的汇总 DNA片段与适当的载体在体外重组后，转化宿主细胞，并通过一定的选择机制筛选后得到大量的阳性菌落(或噬菌体)，所有菌落(或噬菌体)的集合即为该生物的基因文库。 基因文库由外源DNA片段、载体和宿