课件：食品常见有害物质的测定.ppt

* 食品常见有害物质的测定 1 概述 2食品中有机磷农药残留量的测定 3食品中黄曲霉毒素的测定 食品中常见有害物质的测定 有害物质成分： 农药、黄曲霉毒素、苯并比、亚硝胺类化合物、苯酚、多氯联苯、动植物毒素、氰化物、重金属元素、非金属元素、添加剂、激素、抗生素、兽药 食品中农药残留量的测定 农药：农业生产中使用的各类农药。常用的有有机氯农药和有机磷农药2大类。 农药残留：指未分解而留存于土壤作物及环境进而留存与食品的农药。 测定方法：2003年新制定的《食品卫生检验方法》增加了42种测定农药的方法。用得较多的是气相色谱法，其次是高效液相色谱法、分光光度法。 一、有机氯农药残留量的测定 （GB/T5009·19—2003） 方法： 第一法 气相色谱法 第二法 薄层色谱法 有机氯农药的提取步骤： 有机溶剂（丙酮、石油醚）提取 净化 浓缩 食品中有机磷农药残留量的测定 测定方法多，最有代表的： GB/T5009·20—2003： 第一法： 水果、蔬菜、谷类中有机磷农药的多残留的测定该法采用的是气相色谱法，可检测20种有机磷农药。 第二法： 粮、菜、油中有机磷农药残留量的测定。该法采用的也是气相色谱法，可检测9种有机磷农药。 两者区别：用不同的色谱分离柱。 GB/T5009·199—2003（蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测）： 速测卡片（纸片法） 酶抑制率法（分光光度法） 本法为定性检验方法，因为速度快，广泛使用中。 ⑴原理 胆碱酯酶 底物（碘化硫代乙酰胆碱）+显色剂（二硫代二硝基苯甲酸）→有色物质 PH8.0 无农药，胆碱酯酶催化能力强，显色深。 有农药，胆碱酯酶催化能力弱，显色浅。 吸光度变化小，与对照溶液的吸光度差值大，抑制率大，农药含量高。 ⑵试剂 ⑶仪器 ⑷测定步骤 样品处理 对照溶液的吸光度变化值测定 ⊿A0 = A3min－A开始 样品液的吸光度变化值测定 ⊿At = A3min－A开始 ⑸结果计算与判断 ⊿A0－⊿At 抑制率（%）= ——————×100 ⊿A0 若抑制率≥50%为阳性结果，抑制率越大，农药残留量越高。 第二节 食品中黄曲霉毒素的测定 一、有关知识 黄曲霉毒素：AFT 分类：AFTB、AFTG 特征： （1）性质特征 污染粮油及其制品 对光、热、酸稳定，对碱和氧化剂不稳定 （2）结构特征： 含二呋喃环、香豆素 （3）测定方法： 薄层色谱法 牛清抗体反应显色法 微粒筛选法 二、黄曲霉毒素B1（AFT B1）测定（GB/T5009·22—2003） 第一法 薄层色谱法 第二法 牛清蛋白抗体反应显色法 薄层色谱法测定黄曲霉毒素B1测定 1、原理 样品中AFT B1经有机溶剂提取、净化、浓缩并经薄层色谱分离后，在波长365nm紫外光下产生荧光，根据其在薄层板上显示荧光的强度与标准品AFT B1最低检出量产生的荧光强度比较来测定样品中AFT B1的含量。 2、试剂 三氯甲烷（AR） 正己烷（AR 沸程30-60）或石油醚（沸程60-90） 甲醇（AR） 苯（AR） 乙腈 （AR） 无水乙醚 （AR） 丙酮 （AR） (以上试剂应重蒸，并应经检验对薄层色谱测定无干扰） 苯-乙腈(98:2)混合溶液 甲醇-水（55:45）混合溶液 三氟乙酸（AR） 氯化钠 （AR） 无水硫酸钠（AR） 硅胶G （薄层色谱用） 5%次氯酸钠：称取100g漂白精，加入500mL水，搅匀。另将80g工业用碳酸钠（Na2CO3.10H2O）溶于500mL温水中，倒入上述溶液中，搅匀，澄清过滤后贮存于带橡皮塞的玻璃瓶中，用作消毒剂。 黄曲霉毒素B1标准贮备液： 用百万分之一的微量分析天平精密称取1-1.2mgAFT B1标准品，先加入2mL乙腈溶解后，再用苯稀释至100mL，避光置于4℃冰箱中保存。使用前用紫外分光光度计测定其浓度，再用苯-乙腈混合溶液调整其浓度为10ug/mL。（在350nm测定AFT B1的苯-乙腈溶液的吸光度，其摩尔消光系数为19800，可根据朗伯-比尔定律求出其浓度）。 黄曲霉毒素B1标准应用液I（1ug/mL）：吸取1.0mL10ug/mL的黄曲霉毒素B1标准贮备液于10mL容量瓶中，加苯-乙腈混合溶液定容。 黄曲霉毒素B1标准应用液II（0.2ug/mL）：吸取1.0mL 1ug/mL的黄曲霉毒素B1标准应用液