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- 2019-03-07 发布于广东
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* 完全普遍转导的过程 误包 * 流产转导 (1)由phage带入的供体菌基因不交换,不整合,不复制,也不迅速消失; (2)只进行转录,转译和性状表达(eg.产酶等)。 * 局限转导 通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌并表达的转导现象。 供体菌基因 →(部分缺失噬菌体)→ 受体菌 举例: E.coli 的λ噬菌体,在其插入位点两侧为gal和bio基因,不正常切割时可包装入噬菌体外壳,形成缺陷噬菌体,再感染时形成局限性转导。 * 局限性转导过程 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点,宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时,在前噬菌体二侧的少数宿主基因因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 * * 1、低频转导(low frequency transduction,LFT) 温和噬菌体λ裂解时的不正常切割:包含gal或bio基因(几率一般仅有10-6) 缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装,提供所需要的裂解功能,形成转导颗粒。但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力,感染受体细胞后,通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的转导子。 * 2、高频转导(high frequency transduction,HFT) gal 10-6 gal λ噬菌体感染E.coli λ噬菌体误切割 LFT裂解物+噬菌体(辅助噬菌体)感染E.coli 双重溶源菌 LFT裂解物 * 50% 50% 2、高频转导(high frequency transduction,HFT) 形成阳性转导子 形成噬菌斑 gal- gal gal- HFT裂解物感染E.coli(gal-) 双重溶源菌 HFT裂解物 * 比较项目 普通性转导 局限性转导 转导的发生 自然发生 人工诱导 噬菌体形成 错误的装配 前噬菌体反常切除 形成机制 包裹选择模型 杂种形成模型 内含DNA 只含宿主染色体DNA 同时有噬菌体DNA和宿主DNA 转导性状 供体的任何性状 多为前噬菌体邻近两端的DNA片断 转导过程 通过双交换使转导DNA 替换了受体DNA同源区 转导DNA插入,使受体菌为部分二倍体 转导子 不能使受体菌溶源化 转导特性稳定 为缺陷溶源菌 转导特性不稳定 * * 转化、转导、接合的比较 * 四、噬菌体转变(又称溶源转变)1. 定义: 由于温和噬菌体的感染,前噬菌体整合入宿主菌的基因组,使宿主菌获得噬菌体基因编码的某些性状,这种转移方式称为噬菌体转变。2. 实例: 白喉杆菌 产生白喉外毒素。 β-噬菌体 * 五.?? 细胞融合 * 第四节 菌种的衰退、复壮和保藏 菌种退化(degeneration)是指群体中退化细胞在数量上占一定数值后,表现出菌种生产性能下降的现象。 在退化的菌种中仍有一些保持原有菌种特性的细胞,故有可能采取一些相应措施,使这些细胞生长、繁殖,以更新退化的菌株,称之为菌种复壮。 * 常见的衰退现象: 菌落和细胞形态的改变; 生长速度缓慢,产孢子越来越少; 抵抗力、抗不良环境能力减弱等。 代谢产物生产能力或其对宿主寄生能力下降; * 控制传代的次数 创造良好的培养条件 利用不同类型的细胞进行接种传代 对菌种采用有效的保藏方法 菌种衰退的防止 * 菌种的复壮 纯种的分离 通过寄主体进行复壮 淘汰已衰退的个体 菌 种 保 藏 菌种保藏主要是根据菌种的生理、生化特性,人工创造条件使菌体的代谢活动处于休眠状态。 几种常用菌种保藏方法的比较 方法名称 主要措施 适宜菌种 保藏期 评价 冰箱保藏法(斜面) 冰箱保藏法(半固体) 石蜡油封藏法 沙土保藏法 冷冻保藏法 (液氮法,-70℃超低温冰箱,-20℃冰箱冷冻室) 冷冻干燥法 低温 低温 低温、缺氧 干燥、无营养 低温 干燥、无氧、低温、有保护剂 各大类 细菌、酵母菌 各大类 产孢子微生物 各大类 各大类 3~6月 6~12月 1~2年 1~10年 20年以上 5~15年以上 简便 简便 简便 简便有效 简便 有效 简便有效 多歧管冷冻干燥机 液氮罐 中国微生物菌种保藏管理委员会(CCCCM) 美国的典型菌种保藏中心(ATCC) 英国国家典型菌种保藏所(NCTC) 法国里昂巴斯德研究所(IPL) 国内外菌种保藏机构: * * * * 重组修复 在DNA复制时进行的一种越过损伤的修复。 * 一般认为,SOS修复系统是紫外线诱发突变的主要原因。
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