3显微镜直接计数法.pptVIP

实验三、微生物数量的测定;二、实验原理;;干重法 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来，然后烘干至恒重(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。一般干重为湿重的10%—20%。 注：该法适合菌浓度较高的样品。 ; 比浊法;显微镜直接计数法 利用血球计数板在显微镜下计数是常用的一种微生物计数法 优点：直观、快速 缺点：误差较大，不适合细菌计数（太小） 其原理与计数板的构造有关 每块计数板上有两个计数室 （正方形），盖上盖玻片后容积是一定的（0.1mm3），深为0.1mm，边长为1mm，其上面有精确的刻度。;其刻度一般有两种规格;; 我们采用的是25×16的，计数时查5个中方格的总菌数。如图： 计算：1个计数室的总菌数=A/5×25×B 1g（ml）样品中的总菌数=A/5×25×10×1000×B =50,000A×B个;三 实验器材; 四 实验方法; 3．???样品 将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘点一小滴（不宜过多），让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室，一般计数室均能充满菌液。注意不可有气泡产生。;4.显微镜计数 静置几分钟，将计数板放在显微镜下，先用低倍镜找到计数室，再换成高倍镜进行计数 5.清洗血球计数板 计数完毕，将计数板在水龙头下冲洗干净后自行晾干，镜检观察每小格内无残留物为止。 ;注意事项 1、加样时先摇匀菌液，计数室中不可有气泡产生； 2、菌液浓度以每小格有5-10个菌体为宜。 3、计数时，格线上的菌体只数上方和右边线上的； 4、如遇酵母出芽，芽体大小达到母细胞的一半时，作为两个菌体计算； 5、清洗计数板时切勿用手或硬物刷洗。在水龙头上用水柱清洗，直到洗净为止。 6、一个样品要从两个计数室中计得的平均值来计算。;特别注意;显微直接计数结果