探讨实时荧光定量PCR法检测血液新生隐球菌的临床意义.PDFVIP

２８ 实用检验医师杂志 ２０１５ 年 ０３ 月第 ７ 卷第 １ 期 Ｃhｉｎｅsｅ Ｊoｕrｎal oｆ Ｃlｉｎｉｃal Ｐathologｉst, Ｍarｃh ２０１５,Ｖol.７, Ｎo.１ · · 临床研究 探讨实时荧光定量 ＰＣＲ 法检测血液新生隐球菌的 临床意义 黄铭珊 金霆 作者单位 ：３５０１０１ 福州市 ，福建卫生职业技术学院 （黄铭珊 ） ３５０００３ 福州市 ，福州市第一医院检验科 （金霆 ） Ｅ－ｍaｉl ｆｚｆ７７6@１6３.ｃoｍ 通讯作者 ：金霆 ， ： 【摘要】 目的 探讨实时荧光定量 ＰＣＲ （rｅal－tｉｍｅ ｆlｕorｅsｃｅｎt qｕaｎtｉtatｉvｅ polyｍｅrasｅ ｃhaｉｎ rｅaｃtｉoｎ ， ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ ）法检测新生隐球菌感染的临床应用价值 。方法 选择 ２０１4 年 ２ 月－２０１4 年 ７ 月就诊的 4７ 例疑似新生隐球菌感染患者的血液标本 ，采用常规培养基培养方法以及 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法进行检测 ，计算 检测新生隐球菌的阳性率 ，并进行统计学分析 。采用 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法对新生隐球菌 、光滑念珠菌 、克柔念 珠菌 、烟曲霉 、黑曲霉 、大肠杆菌 、肺炎球菌 、金黄色葡萄球菌和链球菌这些常见真菌和细菌的 ＤＮＡ 进 行检测 ，评价 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法的特异性 。 采用 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 和常规培养基培养法对稀释至 ５ 个／ ｍＬ 的新 生隐球菌菌液进行检测 ，评价 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法的灵敏度 。 结果 采用 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法 ，以新生隐球菌特 异性引物为探针对新生隐球菌和其他常见真菌及细菌进行检测 ， 只有新生隐球菌出现荧光信号 。 ＲＴ－ ＦQ－ＰＣＲ 在 ５ 个／ ｍＬ 浓度的新生隐球菌菌液中检测出新生隐球菌 ， 而常规培养基培养法未检测出 。 在 4７ 例疑似新生隐球菌感染患者中 ， 常规培养基培养方法检测出 １１ 例 ， 阳性率为 ２３.4０％ ， 而 ＲＴ－ＦQ－ ＰＣＲ 法检测出 １4 例 ，阳性率为 ２９.７９％ ，二者经比较差异无统计学意义 （Ｐ＞ ０.０５ ）。 结论 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法与常规培养基培养法对新生隐球菌的检测具有很好的一致性 。 且 ＲＴ－ＦQ－ＰＣＲ 法能够检测出较低浓 度的新生隐球菌 ，较常规培养基培养法快速 、灵敏度高 、特异性强 ，可缩短报告时间 ，为临床早期诊断及 治疗新生隐球菌感染提供可靠依据 。 【关键词】 新生隐球菌 ；实时荧光定量 ＰＣＲ 法 ；常规培养基培养法 ｄｏｉ ：１0．３9６9 ／ ｊ．ｉｓｓｎ．１６７４－７１５１．20１５．0１．00８ Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｖａｌｕｅ ｏｆ ＲＴ－ＦＱ－ＰＣＲ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｂｌｏｏｄ １ ２ １ ＨＵＡＮＧ Ｍｉｎg－shaｎ ， ＪＩＮ Ｔｉｎg . Ｔhｅ Ｈｅalth Ｐroｆｅssｉoｎal Ｔｅｃhｎｉｃal Ｃollｅgｅ oｆ Ｆｕjｉaｎ ， Ｆｕｚhoｕ ３５０１０１ ， Ｃhｉｎa ２ Ｄｅpartｍｅｎt oｆ Ｃlｉｎｉｃal Ｌaｂoratory ， thｅ Ｆｉrst Ｈospｉtal oｆ Ｆｕｚhoｕ ， Ｆｕｚhoｕ ３５０００３ ， Ｃhｉｎa 【Ａｂｓｔｒａｃｔ 】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔo ｉｎvｅstｉgatｅ thｅ ｃlｉｎｉｃal applｉｃatｉoｎ valｕｅ oｆ rｅal－tｉｍｅ ｆlｕorｅsｃｅｎt qｕaｎtｉta- tｉvｅ polyｍｅrasｅ ｃhaｉｎ rｅaｃtｉoｎ （ＲＴ