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日立L-8900全自动氨基酸分析仪标准操作规程
一. 目的
为规范日立L-8900全自动氨基酸分析仪的基本操作、维护保养、异常处理程序,防止人为操作失误,确保氨基酸分析仪正常运转,特制定本程序。
适用范围
本程序适用于日立L-8900全自动氨基酸分析仪。
三. 责任
1. 本程序的实施者为氨基酸分析仪操作者,各实验室负责人对本程序的实施情况进行监
督。
2. 日常运行及维护、定期维护、定期点检及保养由氨基酸分析仪操作者负责。
四. 内容
1.联机
(1) 打开电脑。
(2) 打开L-8900主机电源。
(3) 双击桌面的图标,进入1-1画面,双击图标,进入程序。
1-1
(4) 在菜单栏中依次点击和,出现1-2画面,单击联机。大约两分钟,初始化完毕。中Uninitialized变成Idle,图1-2变成了图1-3,各个组件可以进行控制了。初始化完毕后,分离柱的温度逐渐上升,分离柱的温度会升到50℃。 如果打开反应柱的柱温控制,则温度大约20分钟升到135℃。
1-2
1-3
2、手动各组件控制操作
(1) 泵1和泵2
点击,出现2-1的画面。设置泵1,流量0.1ml/分钟,B6 100%。点击打开泵1。泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-1
点击,出现2-2的画面,设置泵2,流量0.1ml/分钟,R3 100%。点击打开泵2。泵打开后,泵的背景颜色由灰色变为黄色。
2-2
(2)自动进样器
点击,出现2-3的画面,设置Sampler Wash不少于3次。
2-3
(3)分离柱柱温箱
点击,出现2-4画面,设置柱温50℃,设置ON,打开柱温箱。柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-4
(4)反应柱柱温箱
点击,出现2-5画面,设置柱温135℃,设置ON,打开柱温箱。柱温箱打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-5
(5)钨灯
点击,出现2-6画面,设置ON,打开钨灯。钨灯打开后,背景颜色由灰色变为黄色。
2-6
3、编辑方法
(1)Stand By 程序
(a)依次点击、、出现3-1-1的画面。
3-1-1
(b)选中,点击。再依次点击、,出现3-1-2的画面。
3-1-2
(c) 在设置中选中各个柱(也可以不选),其余参数默认。
(d)将方法另存为Stand-By,文件名及路径均可自选。注意最好不要覆盖原来的方法,最好另存方法。
(2)再生程序
如同Stand By 程序,只是选中而已。将方法另存为RG。
(3)分析程序
(a) 如同Stand By 程序,选中,参数默认,将方法另存为Analyze。
4、编辑Sequence
(1)依次点击、、,出现4-1画面。选中,其余参数默认。
4-1
(2)点击,出现4-2画面,根据需要填写各个参数(未知样品的个数、未知样品重复次数等)。
4-2
(3)点击,出现4-3画面,根据需要填写各个参数(标样和未知样品的第一个瓶号,增量、进样体积等)。
4-3
(4)点击,出现4-4画面,根据需要填写各个参数(标样品的个数、标样的重复次数等)。
。
4-4
(5)点击,出现4-5画面。
4-5
(6)通过复制、编辑,最终将Sequence编辑如图4-6所示。注意此时第一行是升温程序(Stand-By),第二行是再生程序(RG),两行的进样体积均为0,Run Type是Unknown,第三行是标准样品,四行起是未知样。
(7)将Sequence另存为Test。
5、采集数据
点击Control、Sequence Run,运行Sequence Test。
数据采集完后,机器自动进入清洗程序。清洗一个小时后,自动关泵,关灯,关柱温箱。
6、关机
点击断开连接,关闭程序,关闭主机电源。
7、试剂的准备
反应液R1、R2:醋酸钠(CH3COONa·2H2O)、冰醋酸(CH3COOH)、茚三酮(C9H6O4)、丙二醇甲醚(CH3CH(OH)·CH2OCH3)、硼氢化钠 (NaBH4)
缓冲液B1到B6:柠檬酸钠(Na3C6H5O7·2H2O)、柠檬酸(C6H8O7·H2O)、氯化钠(NaCl)、无水乙醇(C2H5OH)、氢氧化钠(NaOH)、硫代双乙醇(硫二甘醇)(S(C2H4OH)2)、苯甲醇()、brij-35(聚氧乙烯十二烷基谜)、辛酸(C7H15COOH)
试剂建议用优级纯的。
8.出峰情况
Asp: 天门冬氨酸 Thr:苏氨酸 Ser: 丝氨酸 Glu:谷氨酸
Pro: 脯氨酸 Gly:甘氨酸 Ala:丙氨酸 Cys:胱氨酸
Val: 缬氨酸 Met:蛋氨酸 Ile: 异亮氨酸 Leu: 亮氨酸
Tyr: 酪
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