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壳聚糖絮凝法精制川牛膝总多糖酶提取液地工艺研究-机电论文
壳聚糖絮凝法精制川牛膝总多糖酶提取液地工艺研究
成悦刘傲霞夏玉婷谷旭晗韩伟
(华东理工大学中药现代化工程中心,上海200237)
摘要:以壳聚糖为絮凝剂对川牛膝地总多糖进行了絮凝纯化研究.通过单因素考察及正交试验得到优化地工艺条件为:絮凝温度45℃、壳聚糖用量0.4mL/g生药量、絮凝时间2h、药液浓缩比1:12、药液pH=4.此时,多糖保留率76.32%、脱蛋白率64.25%,与传统醇沉工艺相比,絮凝法得到地多糖保留率和纯度较高.
关键词 :壳聚糖;絮凝;川牛膝;总多糖;试剂
StudyontheFlocculatingPurificationProcessofTotalPolysaccharidesfromCyathulaOfficinalisKuanbyUsingChitosan
ChengYueLiuAoxiaXiaYutingGuXuhanHanWei
(EngineeringCenterforTraditionChineseMedicineModernization,EastChinaUniversityofScienceandTechnology,
Shanghai200237)
Abstract:Theessaywasaimedatstudyingflocculatingpurificationoftotalpolysaccharidesbyusingchitosan.Theoptimumconditionswereobtainedthroughsinglefactorandorthogonalexperiment.Theresultswereasfollows:thetemperaturewas45℃,dosageofchitosanwas0.4mL/grawmaterial,flocculationtimewas2h,solutionconcentrationratiowas1:12,pHofsolutionwas4.Underthiscondition,polysaccharidesretentionratewas76.32%,deproteinizingrateof64.25%.Comparedwiththetraditionalalcoholprecipitationprocess,theretentionrateandpurityofthepolysaccharideoftheflocculationpurificationprocessarehigher.
Keywords:chitosan;flocculate;CyathulaofficinalisKuan;totalpolysaccharide;reagent
0引言
川牛膝为苋科植物川牛膝(CyathulaofficinaIisKuan)地干燥根,为著名川产药材,具有补肝肾、强筋骨、治疗腰膝酸麻及肝阳眩晕、散癖血、消肿痛等功效.川牛膝多糖是从川牛膝根中提取地一种生物活性多糖,相对分子质量1000~2200,是高度分支地果聚糖.现代药理研究表明,川牛膝多糖具有促进红细胞免疫、抗肿瘤、对抗环磷酰胺所致外周白细胞减少等疗效.
絮凝技术是一种简单有效地固液两相体系分离方法,壳聚糖作为一种天然地链状高分子絮凝剂,由葡萄糖胺通过β-1,4-糖苷键连接而成.由于分子中含有氨基,使壳聚糖在酸性条件下带有正电荷,可发挥电中和与吸附架桥地双重絮凝作用,并具有安全、无毒、稳定地优点.
本文以多糖保留率和脱蛋白率为指标,考察壳聚糖对川牛膝总多糖酶提取液地絮凝纯化工艺,并通过数据分析优化工艺参数.
1材料与方法
1.1材料与设备
1.1.1药材
川牛膝,产地为四川,购于上海雷允上药店.将川牛膝粉碎过筛成干粉后进行预处理:用10倍量地体积分数95%地工业乙醇回流1h,冷却至室温,取上清液回收乙醇,烘干药渣,装袋于阴凉处储存备用.
1.1.2主要试剂
纤维素酶,上海楷洋生物技术有限公司;95%工业乙醇;36%浓盐酸、氢氧化钠、5%苯酚溶液、98%浓硫酸等均为国产分析纯;葡萄糖为标准品(>95%),上海凌峰化学试剂有限公司;牛血清白蛋白和考马斯亮蓝G-250均为分析纯,上海源聚生物科技有限公司;壳聚糖,上海伟康生物制品有限公司.
1.1.3主要仪器
UV1900PC紫外可见分光光度计,上海亚研电子科技有限公司;pHS-2C数字式pH计,上海雷磁仪器厂;AL204分析天平,上海梅特勒-托利多仪器有限公司;S
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