项目一 动物组织中生核酸的提取与鉴定.pptVIP

动物组织中 核酸的提取与鉴定; 一、实验目的 ; 二、实验原理 ;三、实验材料 ;三、实验材料 ;三、实验材料 ;四、实验方法 ;四、实验方法 ;四、实验方法 ;四、实验方法 ;五、注意事项;六、项目总结及练习;六、项目总结及练习;六、项目总结及练习;六、项目总结及练习;六、项目总结及练习;六、项目总结及练习; 六、项目总结及练习;8、;金属螯合剂（metal chelating agent） ;四、蛋白质的变性 影响因素： 温度 紫外线、超声波 剧烈震荡、搅拌 强酸、强碱 有机溶剂、表面活性剂 重金属盐 胍、尿素等;4、SOD活力测定（邻苯三酚自氧化法） 分别检测提取液、粗酶液、酶液1、酶液2中SOD活力。; 分别从1ml 备用的提取液、粗酶液、酶液各取0.3ml按以下倍数稀释,260nm/280nm测定吸光值,按公式计算蛋白质浓度. 提取液稀释:50 × 粗酶液稀释:20 × 酶液稀释:10 × 蛋白质浓度(mg/ml)=(1.45A280 – 0.74A260) ×稀释倍数;6、计算： 酶活力单位U/ml=2（OD1-OD2）×5/0.1 (1ml反应液中,每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达到50%时的酶量) 总活力U=活力单位×总体积 比活力U/mg=活力单位/蛋白质浓度 纯化倍数=粗酶液(酶液)比活力/提取液比活力 回收率=粗酶液(酶液)总活力/提取液总活力;酶活力单位;酶的比活力