微生物分字离与纯化技术.pptVIP

一、实验目的 二、实验器材及设备 1、无菌培养皿(直径90毫米)、无菌吸管1毫升、盛有90毫升无菌水的锥形瓶、盛有9毫升无菌水的试管5支。 2、培养基(已灭菌的)、土壤颗粒。 三、微生物分离纯化的操作方法 1、取样 （取土样10g） 2、稀释土壤悬浊液 稀释土壤悬浊液操作注意： 3、平板的制作 每组准备两套无菌培养皿，在皿底注明稀释液浓度（10-4、10-5、10-6 中任选两种浓度)、菌名如黑曲霉、班级、组别。 融化锥形瓶中的培养基，放在45-50℃ 恒温水浴锅中备用 制备混合液平板：无菌操作下，打开培养皿在无菌培养皿一边加两滴链霉素液，另一边加１mL土壤稀释液（注意不要让两液相混），倒入45-50℃融化的真菌培养基约1/4-1/3培养皿高度。培养皿平放在桌上顺时针、逆时针轻轻转动，混匀皿中物质。培养基冷凝后即成平板。 恒温培养:平板倒置于28-30℃恒温箱中,培养5-6天后观察真菌菌落形态。 转接纯化:挑取单个菌落,接种到新鲜平板上,培养观察,直至纯化。 平板制作的操作注意： 融化培养基时不要溢出烧瓶或糊底 无菌操作下，打开培养皿的操作 一根１mL移液管多次移液先移低浓度悬浊液，再移高浓度悬浊液。 移液管可以用稀释悬浊液的那根在无菌操作下接着做，也可另取一根无菌的。 为什么培养皿要倒置培养 (二)平板划线分离法（以分离细菌为例） 每组准备两套无菌培养皿,在皿底菌名、班级