赫赛汀对乳腺癌SK-BR3细胞Notch-1通路的影响及意义.docVIP

赫赛汀对乳腺癌SK-BR3细胞Notch-1通路的影响及意义 韩铭，邓华瑜 [通信作者] 邓华瑜，E-mail: cqdenghy@，隆玲 [通信作者] 邓华瑜，E-mail: cqdenghy@ [摘要] 目的 探讨赫赛汀对乳腺癌SK-BR3细胞Notch1蛋白的影响及其作用机制，认识Notch-1信号通路在乳腺癌细胞形成赫赛汀耐药中的意义。方法 选用HER2过表达乳腺癌SK-BR3细胞及HER2非过表达乳腺癌MDA-MB-231细胞，免疫细胞化学法和Western blotting法检测两细胞株中Notch-1蛋白的表达；应用赫赛汀处理SK-BR3细胞，Western blotting法检测HER2、Notch-1活性分子NICD-1的蛋白表达；RT-PCR法检测Notch-1靶基因HES-1 mRNA的表达；免疫共沉淀检测SK-BR3细胞中Notch-1与HER2是否存在相互作用。结果NICD-1核定位水平及NICD-1蛋白表达水平在SK-BR3细胞中明显低于MDA-MB-231细胞（P ＜0.01）；赫赛汀处理SK-BR3细胞后，细胞内NICD-1蛋白及HES-1 mRNA水平均明显增高（P ＜0.05），HER2蛋白表达在处理前后未发生明显变化（P 0.05）；免疫共沉淀结果显示Notch-1与HER2蛋白之间存在共沉淀。结论 Notch-1在HER2过表达乳腺癌细胞中