S基因敲除小鼠的胶质细胞对面神经损伤后神经再生的影响.PDFVIP

第35卷第3期 同济大学学报(医学版) V01．35No．3 2014年6月 JOURNALOF Jun，．2014 TONGJ／UNIVERSITY(MEDICALSCIENCE) doi：10．3969／j．issnl008—0392．2014．03．009 ·基础研究· CathepsinS基因敲除小鼠的胶质细胞 对面神经损伤后神经再生的影响 郝海鹏，季振威 (同济大学附属同济医院1=1腔科，上海200065) 【摘要】目的研究胶质细胞内丝蛋白水解酶Cathepsins(cs)对小鼠面神经损伤后神经再生的影响。方法将 cs基因敲除(cs一／一)小鼠和野生型小鼠的一侧的面神经在茎乳孔处离断，术后2、4、7、14、30、50d取出含面神 CystanC(CysC)、Iba一1或者F4／80抗体结合反应进行胶质细胞免疫荧光双重染色。术后7d．取两组合FMN的脑 干，用HBG标记的CS、CysC和TNR抗体作Westernblot分析。术后7 d取两组合FMN的脑干，用Quickprep mRNA套装进行CS、CysC的RT—PCR定量分析。结果面神经离断后7d，野生型胶质细胞包绕神经元，但 CS一／一胶质细胞仅仅接触而不包绕神经元。免染结果提示，CS出现在野生型胶质细胞。而极少出现在CS一／一 胶质细胞，CysC在两组均增加，同时，CS一／一胶质细胞对TNR的降解能力显著低于野生型胶质细胞。RT-PCR和 内明显减少。对chAT染色的面神经元统计显示，术后50d，CS缺失造成了神经元存活率降低，与野生型有显著性 差异。结论面神经离断后，CS的缺失会使神经元容易死亡，CS在激活的胶质细胞内的表达对损伤的神经元的 保护及恢复起到重要作用。 【关键词】CS基因敲除小鼠；面神经切断；面神经元生存 【中图分类号】R322．85【文献标志码】A【文章编号】1008—0392(2014)03—0037-05 Effectsof Sin on of regeneration cathepsinmicroglia facialnerveafter injury HAO Zhen—wei Hai-peng，Jl University，Shanghm200065，China) (Dept．ofStomatology，TongjiHospital，Ton萄i To theeffectof cathepsinS(CS)in 【Abstract】Objectiveinvestigate lysosomalcysteineprotease offacialnerveafter The facialnervesofCS一／一and regeneration injury．Methodsright wild—type miceweretransected 1 ITlmatthe foramen．Thebrainstem facial appro