苦味酸法测定血清肌酐.pptVIP

实验五 苦味酸法测定血清肌酐 一、实验目的 1.掌握血清肌酐的测定原理和方法。 2. 了解肌酐测定的参考范围及临床意义。 二、实验原理 在碱性条件下，血清中的肌酐（Cre）苦味酸反应，生成橘红色的苦味酸肌酐复合物。检测505nm波长处吸光度的变化，可知被测血清中的肌酐的浓度。其反应式如下： 肌酐+碱性苦味酸 红色物质 四、试剂 1.试剂：R1：氢氧化钠 R2：苦味酸 工作液：将R1与R2按1：1的比例混合面成。 2.肌酐标准应用液(133μmol/L)　 五、操作步骤 取试管5支，按下表操作 六、计算 七、注意事项 八、临床意义 九、方法学评价 1.化学法：即苦味酸法，该法成本低廉，方法简便，但试剂具毒性和腐蚀性。 2. 酶法：准确度和灵敏度高，采用两点速率法，适合于自动生化分析仪检测。 *Allison Anne Welder, Ph.D. * * * * * * * * * * * 肌酐（CRE）是人体内肌酸代谢的最终产物，由肾排出，少部分来自食物，大部分在体内生成，血肌酐的浓度主要取决于GFR。 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大。 肌酐测定方法有化学法和酶法。 酶法主要有三种类型：肌氨酸氧化酶法、肌酐氨基水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法。 OH- 1、主要器具 微量移液器 三、器材 试管与试管架 三用水浴箱 可见分光光度计 —— 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 0.75 R1 R2 0.15 —— —— 0.15 生理盐水 —— —— 0.15 —— 133μmol/L肌酐标准应用液 0.75 0.75 0.15 —— —— 血清 S1 测定管(U) 标准管 空白管 加入物（ml） U1 S2 0.15 U2 —— —— 0.75 0.75 混匀后，37度水浴箱放置，2分钟后，波长505nm处，空白管调零，先读取S1、U1吸光度，5分钟后再读取S2、U2吸光度。 参考区间：男性：62-115μmol/L 女性：53-97μmol/L 血清肌酐（mmol/L）= ΔAU/ΔAS×133μmol/L 1.血标本无溶血，应及时处理。 2.工作液开盖混合后，应置2-8度避光保存，稳定期3天。 肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收，通过肾小管排泄。只有当GFR下降到正常的1/3时，Scr才明显上升，是反眏GFR减退的后期指标。 增高：见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退：各种肾病，急慢性肾衰竭、重度充血性心力衰竭、心肌炎等。 降低：见于尿崩症、进行性肌萎缩、白血病、贫血等 * * * * * * * * * * * * * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. ? 2004 McGraw-Hill Ryerson. * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. ? 2004 McGraw-Hill Ryerson. * * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. ? 2004 McGraw-Hill Ryerson. * * * * * * * * * * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. ? 2004 McGraw-Hill Ryerson. * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. ? 2004 McGraw-Hill Ryerson. * * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. ? 2004 McGraw-Hill Ryerson. *Allison Anne Welder, Ph.D. * * * * * * * * * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. *Allison Anne Welder, Ph.D. * * * * * * * * * * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. * * ? 2004 McGraw-Hill Ryerson Ltd. *Allison Anne Welder, Ph.D. * * * * * * * * *