黄瓜异戊烯基转移酶基因CsIPT2的克隆及特征分析-南京农业大学学报.PDF

摇 南京农业大学学报摇 2014,37(1):21-26 http:/ / 摇 Journal of NanjingAgricultural University doi:10.7685/ j.issn.1000-2030.2014.01.004 試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試 张停林,崔利,李季,等.黄瓜异戊烯基转移酶基因(CsIPT2)的克隆及特征分析[J].南京农业大学学报,2014,37(1):21-26 黄瓜异戊烯基转移酶基因(CsIPT2)的克隆及特征分析 张停林,崔利,李季,郭勤卫,娄群峰,徐建,陈劲枫* (南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/ 园艺学院,江苏 南京210095) 摘要:为了分析黄瓜异戊烯基转移酶基因(CsIPT2)在果实发育不同模式中的转录变化以及对不同激素的转录应答情况,对 CsIPT2基因进行了克隆和序列分析,再利用荧光定量PCR技术分析该基因在黄瓜单性结实自交系EC1和非单性结实自交 系8419s-1果实发育过程中的表达情况,并分析了CsIPT2对不同激素的应答反应。 结果表明:CsIPT2 基因全长843 bp,共 编码280个氨基酸,蛋白空间结构模型与蛇麻IPT蛋白极其相似。 该基因不仅在授粉后的黄瓜果实发育中表达量上调,而 且在黄瓜天然单性结实前期和人工诱导的单性结实后期表达量均有增加,推测该基因在促进黄瓜果实发育过程中发挥着 重要作用,同时也可能参与了黄瓜单性结实的调控过程。 GA、ET、6-BA、ABA和NAA5种激素都能够诱导该基因的上调表 达。 其中GA处理后3 h基因表达量最高,ET、6-BA、ABA和NAA诱导的表达峰值出现在处理后6 h。 随着NAA处理浓度 的增加基因的表达量上调幅度增大。 关键词:黄瓜;黄瓜异戊烯基转移酶基因(CsIPT2);克隆;表达分析 中图分类号:S642.2摇 摇 摇 摇 文献标志码:A摇 摇 摇 摇 文章编号:1000-2030(2014)01-0021-06 Isolation and characterization of isopentenyl transferase gene in Cucumis sativus(CsIPT2) ZHANGTinglin,CUI Li,LI Ji,GUO Qinwei,LOU Qunfeng,XUJian,CHENJinfeng* (State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement/ College of Horticulture, Nanjing Agricultural University,Nanjing210095,China) Abstract:To analyze the role of isopentenyl transferase gene in Cucumis sativus(CsIPT2)during fruit development of cucumber and response after different hormones treatment,based on cloning and sequence analysis of CsIPT2 gene,parthenocarpic line EC1 and non鄄parthenocarpic line8419s鄄1were used for real鄄time RT鄄PCR analysis.The results showed that the length of CsIPT2 gene was 843 bp,encoding280 amino acids.The protein structure model was extremely si