GB/T 36833-2018马铃薯X病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01 B 16 国 中华人民共和国国家标准 GB/T 36833-2018 马铃薯 X 病毒检疫鉴定方法 Detection and identification of Potato virus X 2018-09-17 发布 2019-04-01 实施 国家市场监督管理总局峪非 中国国家标准化管理委员会 0(.. I (J GB/ T 36833-20 18 目lj 昌 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会（SAC/TC 271）提出并归口。 本标准起草单位： 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中华人民共和国中山出入境检验检疫 局、中国检验检疫科学研究院、晰江大学、中华人民共和国山东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人： 刘洪义、刘忠梅、车瑞丰、陈定虎、魏梅生、张星哲、李桂芬、 张永江、吴建祥、 封立平、袁建江、杨立群。 I GB/T 36833-2018 C.2.2 RT-PCR 反应 C.2.2.1 引物序列 表 C.1 RT-PCR 检测的引物序列 引物名称 可｜ 物序列 PVX-RT -F 5’－GCTG八八CGGTTAAGTTTCCATTGAT八C-3 PVX RT R 51 CGTAGTTATGGTGGTGGGAGAGTG-3 C.2.2.2 反转录合成cDNA 反转录体系见表C. 2 。 表 C.2 反转录体系 试剂l名称 加lJ佯休积／µL RNA 2 20 ,um ol/L PVX-RT-R l 在70 ℃满育 5 min ，然后立即置于冰上； 放置5 min 4 5×反转录反应缓冲液 10 mmol/L dNTPs l 40 U/ µL RNA 酶抑制齐I 0.5 200 U/ µL M- MLV 反转录酶