液相色谱的方法开发-梯度方法.pptVIP

液相色谱的方法开发 （二）梯度方法 梯度洗脱的特点 优点 单位时间的分离能力增加 检测灵敏度提高 缺点 仪器设备要求高 不适合某些检测方式 柱需再生 定量分析的重复性较低 梯度的洗脱方式 高压梯度及低压梯度 梯度洗脱的可变参数 A及B液的成分和化学特性 梯度的陡度 梯度的变化形状 如不用梯度：分离不理想 梯度条件的优化 梯度曲线的变化∶凹线 梯度曲线的变化∶凸线 梯度平衡时间的影响（一） 梯度平衡时间的影响（二） 有机污染物的影响（一） 有机污染物的影响（二） 有机污染物的影响（三） 梯度方法开发实例 - 第一步 梯度方法开发实例 - 第二步 梯度方法开发实例 - 第三步 梯度方法开发实例 - 第四步 梯度方法开发实例 - 第五步 梯度方法开发实例 - 第六步 梯度方法开发实例 - 第七步 10分钟的梯度，6分钟的平衡时间色谱图不重复 平衡时间∶6分钟 平衡时间∶7分钟 平衡时间∶8分钟 平衡时间∶9分钟 平衡时间从6到7分钟，第一个峰的保留时间有明显的变化，说明6到7分钟的平衡时间不足，而8到9分钟变化不大因而大于这个时间时，平衡充足。 50ml超纯水的有机物污染状态 “三蒸水”有大量的有机污染物不适合梯度分析 典型的“实验室水”有大量的有机污染物不适合高灵敏度梯度分析 开发一个有9个烷基苯酮化合物的梯度方法，用C18柱，在最初的