大鼠酒精性肝病细胞凋亡与细胞色素P450 2E1和氧化应激的关系.pdf

维普资讯 中国危重病急救医学 2007年 7月第 19卷第 7期 ChinCritCareMed，July2007，Vo1．19，No．7 ·419 · · 论 著 · 大 鼠酒精性肝病细胞凋亡与细胞色素P4502E1 和氧化应激的关系 金武丕 权修权 孟繁平 崔香丹 朴海今 【摘要】 目的 观察酒精性肝病 (ALD)大 鼠肝组织病理学改变 ，探讨细胞凋亡与细胞色素Pl)2E1 (CYP2E1)的表达以及与氧化应激的关系。方法 用乙醇灌 胃法制备ALD大鼠模型，模型组 (37只)给予体积 分数为4O 的乙醇8g ·kg ·d-1分两次灌 胃，连续 8周 ；对照组 (33只)给予等量生理盐水灌 胃。实验第8周 末 ，各组选 3O只大 鼠观察肝组织 的病理学改变 ；用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺 口末端标记法 (TUNEL)检测肝细胞凋亡，用全 自动生化仪检测丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)值，用聚合酶 链反应 (PCR)法测定肝 CYP2E1的表达 ；分别用硫代 巴比妥酸法和黄嘌呤氧化酶法测定血清丙二醛 (MDA) 含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性 。结果 模型组凋亡的肝细胞 明显增多，主要分布在 中央静脉周围、点状和 灶状坏死 区。对 照组 CYP2E1的c1基 因频率为 91．65 、c2基 因频率为 8．35 ；模型组 c1基 因频率为 53．35 、c2基 因频率为 46．65 ，差异均有显著性 (尸均O．05)。长期摄人 乙醇的大 鼠血清 MDA含量增加 ， SOD活性下降，与 ALD肝细胞凋亡程度有相关性 (rDA一0．644，rsoD一一0．511，尸均0．05)，且 MDA与 SOD两指标问呈负相关 (r一一0．582，P0．05)。结论 长期摄人乙醇可引起大 鼠ALD及肝功能损伤，肝细胞 凋亡 明显增加 。CYP2E1基 因PstI及 RsaI限制性片段长度多态性与 ALD有关，其 中c2基 因可能与大 鼠 ALD的发生有关。MDA含量和SOD活性在ALD的肝细胞凋亡过程及脂质过氧化反应中发挥重要作用。 【关键词】 肝病 ，酒精性 ； 凋亡 ； 细胞色素 P4502El； 氧化应激 Relationship amonghepatocyteapoptosis，P450 2Eland oxidativestressin alcoholicliverdiseaseofrats |，Ⅳ 一户 ，QUAⅣ Xiu-quan，MENGFan—ping，(， Xiang—dan，尸 AoHai-jin． AffiliatedHospital ofYanbianUniversity，y口 133000，Jilin，China 【Abstract】 Objective Toobservethepathologicalchangesand investigatethecorrelation of hepatocyteapoptosiswithcytochomeP4502E1(CYP2E1)expressionandoxygenfreeradicalinalcoholicliver disease(ALD)inrat．Methods 40 ethanolinthedoseof8g／kgbodyweightwasgiventoratsbygavage twicedailyfor8weeksinmodelgroup (，2— 37)，andratsincontrolgroup(，2— 33)receivedsamevolumeof salinebygavage．Attheendofthe8th week，thecontentsofserum alanineaminotransferase (ALT)and aspartateaminotransferase(AST)weredetermined．Thepathologicalchangesintheliverwasobservedunder lightmicroscopewith hematoxylinand