分离精制课时.pptVIP

提取、分离、纯化的技术线路与目的： 结晶法 结晶、重结晶和分步结晶法 目的：精制—制备单体！ 鉴定中草药化学成分，研究其化学结构，必须首先将中草药成分制备成单体纯品。 研究中草药化学成分时，一旦获得结晶，就能有效地进一步精制成为单体纯品。 重结晶及分步结晶操作方法 重结晶法? 分步结晶法或分级结晶法 ? 注意：分步结晶法各部分所得结晶，其纯度往往有较大的差异，但常可获得一种以上的结晶成分，在未加检查前不要贸然混在一起。 结晶纯度的判定 方法：检查有无均匀一致的晶形，有无明确、敏锐的熔点（熔距一般为1-2℃，有的要求0.5左右）及色谱法。 色谱法 检查结晶纯度——常用重要方法 薄层层析或纸层层析法 经数种不同展开剂系统 检定（一个斑点） 高压液相或气相层析： 单峰 ①专属试剂沉淀法 Φ 如在生物碱盐的溶液中，加入某些生物碱沉淀 试剂，则生物碱生成不溶性复盐而析出。 水溶性生物碱难以用萃取法提取分出，常加入雷 氏铵盐使生成生物碱雷氏盐沉淀析出。 Φ 又如橙皮甙、芦丁、黄芩甙、甘草皂甙均易溶于 碱性溶液，当加入酸后可使之沉淀析出。 Φ 可以用明胶、蛋白溶液沉淀鞣质； Φ 胆甾醇也常用以沉淀洋地黄皂甙等。 ②分级沉淀法 Φ水醇沉淀法： ①水提取醇沉淀法，于水提浓缩液中加入乙醇使含醇量达60%以上，可使多糖、蛋白质沉淀。 ②醇提取水沉淀法，于醇提取浓缩液中最好加入10倍量以上水，可沉淀亲脂性成分 以上沉淀法可根据中草药有效成分和杂质的性质，适当选用。 ③ 盐析法 盐析法是在中草药的水提液中、加入无机盐至一定浓度，或达到饱和状态，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而与水溶性大的杂质分离。 常用作盐析的无机盐：氯化钠、硫酸钠、硫酸镁、硫酸铵等。 萃取分离 溶剂萃取(Solvent extraction) 法 萃取使用原则 1. 如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质，一般多用亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚进行两相萃取。 2. 如果有效成分是偏于亲水性的物质，在亲脂性溶剂中难溶解，就需要改用弱亲脂性的溶剂，例如乙酸乙酯、丁醇等。 如，提取黄酮类成分时，多用乙酸乙脂和水的两相萃取。提取亲水性强的皂甙则多选用正丁醇、异戊醇和水作两相萃取。 1. 协同效应与协同萃取体系 萃取分离 简单萃取方法的优化——连续萃取法 优点：克服使用分液漏斗多次萃取的麻烦 采用仪器：连续萃取器——形式多样！ 原理：利用两溶剂的相对密度不同自然分层，分散相液滴穿过连续相溶剂时发生传质。 注意：选用连续萃取法时，需视所用溶剂的相对密度大于或小于被提取的水溶液相对密度的情况选用不同式样的仪器！ 如图！简单的连续萃取器 萃取分离 萃取分离 1. 液固萃取----索氏 (Soxhlet) 萃取 2. 溶剂/微波萃取 萃取法的发展及新技术 浊点萃取法(cloud point extraction，CPE)：是近年来出现的一种新兴的液—液萃取技术，它不使用挥发性有机溶剂，不影响环境。它以中性表面活性剂胶束水溶液的溶解性和浊点现象为基础，改变实验参数引发相分离，将疏水性物质与亲水性物质分离。目前该法已成功地应用于金属螯合物、生物大分子的分离与纯化及环境样品的前处理中。 应用 环保：从氰化物溶液中萃取有色金属氰络物一般用高分子有机胺类，如氯化三烷基甲胺（N263）、稀释剂为高碳醇、溶剂是磺化煤油。水相即是要处理的废水。 在黄金行业中，用溶剂萃取法提取纯金、银已有许多研究，在国外，其成熟技术已经工业应用多年。 天然产物行业：应用更广泛。 2) 膜分离法 经典— 透析法（生化！） 透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。 透析膜有动物性膜、火棉胶膜、羊皮纸膜（硫酸纸膜）、蛋白质胶膜、玻璃纸膜等。 4. 根据物质分子大小差别进行分离 1）凝胶过滤法（Gel filtration） 凝胶过滤法也叫凝胶渗透色谱(Gel permeation chromatography)、分子筛过滤（molecular sieve filtration）、排助色谱（exclusion chromatography）， 是利用分子筛分离物质的一种方法。其中所用载体，如葡聚糖凝胶，是在水中不溶、但可膨胀的球形颗粒，具有三维空间的网状结构。 原理：分子筛原理。即利用凝胶的三维网状结构的分子筛的过滤作用将化合物按分子量大小