抑制性消减杂交技术在水产无脊椎动物中应用.docxVIP

抑制性消减杂交技术在水产无脊椎动物中应用 摘要：抑制性消减杂交（SSH）技术是一种鉴定、 分离、筛选组织细胞中未知基因表达的新技术，它与抑制PCR 与消减杂交相结合，具有灵敏度高、操作简便、假阳率低于 特异性强等优点，目前在水生动物基因差异表达中已离不开 这一新技术。随着抑制性消减杂交技术近年来被越来越多地 关注，其相应的完善与改进也得以不断向前推进。本文就抑 制性消减杂交技术的原理与优缺点，阐述了这一技术在水产 无脊椎动物中的研究进展及应用。 关键词：抑制性消减杂交技术；在水产无脊椎动物中； 研究进展；应用 中图分类号：S917.4文献标识码：A 自20a前，由于分子生物的迅猛发展与物种基因组全序 列测定计划的逐渐结束，分子生物学的研究重心已转向表达 调控功能与基因功能研究。抑制性消减杂交（SSH）技术是 一种鉴定、分离、筛选组织细胞中未知基因表达的新技术， 它与抑制PCR与消减杂交相结合，具有灵敏度高、操作简便、 假阳率低于特异性强等优点，逐渐被学界视为应用前景最看 好的一种分子生物学研究方法。 1抑制性消减杂交（SSH）技术的原理 抑制性消减杂交(SSH)技术是在抑制性PCR的基础上, 结合消减杂交步骤与均等化检验子DNA单链步骤，简单快捷 地分离差异基因的方法，即富集差异序列，消减同源序列。 这一方法根据杂交二级动力学，使分子间原有单链DNA 的丰度差异消失、DNA相对