新 免疫组织化学技术.pptVIP

第三节 免疫酶组织化学技术 一、免疫酶组织化学基本原理 将酶连接在抗体上制成酶标抗体，借助酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于光镜或电镜下显示细胞表面或细胞内部各种抗原成分的定位。 标记酶应当满足以下要求： ①酶的活性高并且稳定； ②终产物稳定，不扩散，有良好的定位； ③酶与抗体结合不影响抗原-抗体的特异性反应； ④在组织与体液中不存在内源性酶及其底物。 常用酶类： 辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase，HRP), 碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase，AP)、 葡萄糖氧化酶（glucose oxidase, GOD） HRP 底物: 过氧化氢 供氢体：二氨基联苯胺 (Diaminobenzidine, DAB) 4-氯-1-萘酚（4-chloro-1-naphthol，4-CN） 3-氨基-9乙基咔唑 (3-amino-9- ethylcarbozole, AEC)