苔藓植物SRAP反应体系的优化-河南农业科学.PDFVIP

DO I :10.15933/j .cnki .1004 -3268.2009.11.002 2009 年第 11 期 SRAP 张安世,邢智峰,韦慧彦, 张为民,刘永英 ( , 454001) :以黄灰藓总DNA 为材料, 对影响SRAP-PCR 反应的模板DNA 、Mg2+、dNTP 、引物和Taq DNA 聚合酶浓度等因素进行了优 , 分析了各因素对SRA P-PCR 扩增结果的影响。结果表明, 在25μL SRA P-PCR 反应体系中, 最佳反应条件为:模板DNA 40ng;Mg2+ 浓度2.0mmol/L;dNT P 浓度0. 2 mmol/L;正反引物15pmol;Taq DNA 聚合酶2.0U。在此条件下, 引物组合Me5/em7 对13 种苔藓 植物扩增的条带清晰、多态性好,表明此反应条件适合于苔藓植物的SRA P-PCR 反应体系。 :苔藓;序列相关扩增多态性;优 ;反应体系 :Q78 1 　　:A 　　:1004-3268 (2009)11-010 8-04 Op imiza ion of S RA P Reac ion Sy s em in Bryophy es ZH A N G A n-shi,XIN G Zhi-feng ,WEI Hui-y an,Z HA N G Wei-min, L IU Yong-ying (Depar men of Bio log y,Jiaozuo T eacher s Colleg e,J iao zuo 4 54001, China) Abstract:T o ob ain he op i mum SRA P-PC R reac i on sy s em fo r Hypnum pallescens, 5 fac o rs 2+ (T empla e D NA, M g , dN T P , primer, Taq DNA polyme rase )i nf luencing SRA P-PC R reac io n sy s em w as es ed and analy sed hei r eff ec s on SRA P-PCR am plif ica i on.Reac ion in 25μL reac- i on sy s em con aini ng 40ng empla e DN A, 2.0mmo l/L Mg Cl2 , 0.2 mmo l/L dN T P s, 15 pmol primer and 2.0U Tag D NA polym erase go he op im al resul s.Under hi s op i mal co ndi io n, clear and polym orphic bands f rom 13 species of bryophy es w as ob ained u sing pri mer Me5/em 7. T he resul s show ed ha he reac ion condi io n w as sui able f or S RA P-PCR reac io n sy s em o f bryo phy es. Key words:Bry ophy es;SRA P ;Op imiz a ion ;Reac i on sy s em 　　SRA P (sequence-rela ed ampllified polymorphism, , [5] ), , 23 000 , [1] Li 2001 。