偏肿革裥菌锰过氧化物酶的分级纯化.PDFVIP

第 53 卷 第 8 期 林 业 科 学 Vol. 53 ，No. 8 2 0 1 7 8 SCIENTIA SILVAE SINICAE Aug． ， 年 月 2 0 1 7 doi :10．11707 / j．1001-7488 偏肿革裥菌锰过氧化物酶 的分级纯化* 张玉龙1 池玉杰1 冯连 荣1 ，2 (1． 东北林业大学林学院 哈尔滨 150040 ; 2． 辽 宁省杨 树研究 所 盖 州 115213) : 【 】 (Lenzites gibbosa ) (MnP) ， L． gibbosa 摘 要 目的 研究 白腐 菌 偏 肿 革 裥 菌 锰 过 氧 化 物 酶 的分级 纯 化 以期 得 到 MnP 的纯 品和 进行 后 续酶 学性质研究。 【 】 L． gibbosa MnPs 、 MnPs 方 法 在 对 所 产 进 行 优 化 培 养 获 得 大 量 粗 酶 液 ， (NH ) SO 分 、 (PEG ) 、 、 的基础 上 通 过硫 酸 铵 4 2 4 级 盐 析 聚 乙二 醇 沉 淀 进 行 粗 酶 液 浓 缩 在 起 始 缓 冲 液 中进 行 透 析 经 DEAE － 琼 脂 糖 CL-6B 离 子 交 换 柱 层 析进行 梯 度 洗 脱 和葡 聚 糖 G-75 凝 胶 过 滤 柱 层 析等 方 法 对 MnPs 粗 酶 液进行 纯 ， ， SDS。 【 果 】 在 化 并对 分级 纯 化 方 法 进 行 优 化 对 纯 化 浓 缩 后 的 纯 酶 样 品采 用 方 法 进 行 酶 纯 度 检 验 结 75% 、80% 85% 3 (NH ) SO ，85% (NH ) SO MnPs ， 和 这 种 4 2 4 饱 和 度 中 的 4 2 4 是沉 淀 的适 宜饱 和度 在该 饱 和度 下 测 得 － 1