生产菌种的来源.pptVIP

* BIA bacteria inhibition assay * * * 举例某种氨基酸 * * * 研究机关的规定， 河里 铃铛 * * 天然豆 * * * * * 斜体 伤寒沙门氏菌：食物中毒 霍乱：腹泻，拉肚 * 伤寒沙门氏菌：食物中毒 霍乱：腹泻，拉肚 * 醌 * * * * * * * 已知10万种 * 命名的根据 * * 帚zhǒu * * * * 病原菌 * * * * * * 唯一碳源，唯一氮源 * 唯一碳源，唯一氮源 * * * * * * 比纯培养物效果好 * 唯一碳源，唯一氮源 * * * * * * * 土样中放线菌的非选择性分离：土样风干，磨碎，无菌海绵压印土样后压印平皿，培养。 植物体上放线菌的分离：取植物组织，干燥以减少细菌数量，剪碎植物材料后植入平皿表层培养。也可洗下微生物后振荡培养。 水中放线菌的分离：为使所要分离的放线菌的数量种类增多，一般将水样离心或滤纸过滤，浓缩后涂布于平皿上。 方法 《放线菌的分离》 菌落形成后可根据肉眼可见的菌落形态上的差异，作初步的鉴定和区分。 通过高倍放大进行镜检，可了解气生和营养孢子形成情况。 成功地分离出各种不同的放线菌属及种的关键是所采集样本的本身及其分离用的琼脂培养基 将分离平皿上所形成的菌落用经火焰灭菌的接种棒或无菌牙签挑取，点接到琼脂平皿上进行影印培养，以进一步筛选和分离。 次代培养及纯化 《放线菌的分离》 《放线菌菌落形态》 《抗生素抗性菌——人类》 细菌产生一种或多种水解酶或修饰酶，水解或修饰进入细菌细胞内的抗生素，使之失去生物活性； 细菌有一种依赖能量的主动转运机制，能够把进入细胞的抗生素排出体外； 细菌细胞膜的透性或者其他性质发生改变； 抗生素的作用靶点由于发生突变。 《抗生素抗性菌——人类》 MRSA（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus） 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（超级细菌） 青霉素，氨苄青霉素，头孢霉素，，，甲氧西林青霉素 万古霉素（Vancomycin），氨基酸类似物 VRE(Vancomycin-resistant Enterococcus） 万古霉素抗药性肠球菌 《真菌分离》 利用低碳／氮比的培养基可使真菌生长菌落分散，利于计数，分离和鉴定。这里主要是利用营养成分的减少而使生长减慢，并由此限制真菌的迁徙生长。 改变培养温度将有利于不同嗜温区真菌的分离。 有时，真菌子实体形成必须有光线，这在分离培养时应加以考虑。 加入抗生素，抑制细菌的生长。 培养基 《真菌分离》 土中真菌的分离：稀释法，混入法，压贴法，粘附法，浮选法，注射器采集法，土过筛法，庶糖密度梯度离心法。 植物材料中真菌的分离：植入法，压贴法，洗涤法，浸泡法。 水中真菌的分离：水样稀释后涂布分离。 方法 抗肿瘤药物产生菌的分离 抗肿瘤药物基本上作用在核酸生物合成上，微生物与人类的核酸结构和生物合成相似性大，可借用抗生活性筛选抗肿瘤药物。 生化诱导法（BIA）：酶活性分析检测DNA损伤 (Bacteria Inhibition Assay) PL启动子 lacZ 阻遏基因 LacZ 阻遏蛋白 特殊底物 显色 物质 抗肿瘤药物基本上作用在核酸生物合成上，微生物与人类的核酸结构和生物合成相似性大，可借用抗生活性筛选抗肿瘤药物。 生化诱导法（BIA）：酶活性分析检测DNA损伤 (Bacteria Inhibition Assay) PL启动子 lacZ 阻遏基因 LacZ 阻遏蛋白 特殊底物 显色 物质 某种化合物 DNA损伤 抗肿瘤药物产生菌的分离 抗肿瘤药物产生菌的分离 SOS生色检验法：生色反应检测DNA损伤 PsifA启动子 lacZ 阻遏基因 LacZ 阻遏蛋白 活化RecA蛋白 DNA损伤 分解 特殊底物 显色 物质 酶抑制剂产生菌的分离 靶酶：生理和病理明确的酶。 在体外有抑制靶酶的物质在体内也可能会有药理作用 生长因子产生菌的分离 目的：寻找谷氨酸生产菌 方法：利用谷氨酸营养缺陷型株寻找 标本培养 影印 影印后杀死 涂布谷氨酸营养 缺陷型菌株 缺少谷氨酸 的培养基 营养培养基 缺少谷氨酸 的培养基 缺少甘氨酸 的培养基 《要点》 生物物质产生菌的采集 微生物是生物活性物质的丰富资源 标本采集 标本预处理 2 菌株的分离 施加选择压力的分离法 随机分离法 注意事项 生产菌种的来源 koko 注意事项 从自然界中分离微生物伴随着危险 注意事项 避免单独行动 利用公共交通 确保联络手段 通知当地管理人员 《对实验室的要求》 P1级（非病原菌） 一般微生物学实验室，实验室内禁止饮食、吸烟及保存食物，关闭实验室的门窗